[发明专利]一种检测橄榄油中天然维生素E含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然产物含量测定领域，具体为一种检测橄榄油中天然维生素E含量的测定方法。

背景技术

天然维生素E（VitaminE）是一种脂溶性维生素，又称生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。生育酚能促进性激素分泌，使男子精子活力和数量增加；使女子雌性激素浓度增高，提高生育能力，预防流产，还可用于防治男性不育症、烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容等方面有很好的疗效。近些年还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末稍血管扩张，改善血液循环。

各种植物油是人们日常生活中获取天然维生素E的主要来源之一，不同品种的植物油中天然维生素E的含量有较大差异，因此天然维生素E的组成和含量可以作为食用植物油脂品质的一个重要评价指标。

橄榄油是由新鲜的油橄榄果实直接冷榨而成的，不经加热和化学处理，保留了天然营养成分。橄榄油被认为是迄今所发现的油脂中最适合人体营养的油脂。

橄榄油和橄榄果渣油在地中海沿岸国家有几千年的历史，在西方被誉为“液体黄金”，“植物油皇后”，“地中海甘露”，原因就在于其极佳的天然保健功效，美容功效和理想的烹调用途。可供食用的高档橄榄油是用初熟或成熟的油橄榄鲜果通过物理冷压榨工艺提取的天然果油汁，（剩余物通过化学法提取橄榄果渣油）是世界上以自然状态的形式供人类食用的木本植物油之一。

橄榄油富含丰富的单不饱和脂肪酸——油酸，还有维生素A、维生素B、维生素D、维生素E、维生素K及抗氧化物等。橄榄油被认为是迄今所发现的油脂中最适合人体营养的油。

橄榄油突出特点是含有大量的单不饱和脂肪酸。单不饱和脂肪酸除能供给人体热能外，还能调整人体血浆中高、低密度脂蛋白胆固醇的比例，能增加人体内的高密度脂蛋白HDL(好胆固醇)的水平和降低低密度脂蛋白LDL(坏胆固醇)水平，从而能防止人体内胆同醇过量。因此，对于习惯摄食肉类食物而导致饱和脂肪酸与胆固醇摄入过多的人，选择橄榄油做食用油，便能有效的发挥其降血脂的功能，从而可以防止发生高血脂症、脂肪肝和保护心脏，有助于减少高血压病、冠心病、脑中风等富贵病的发生风险。

目前，维生素E的分析方法包括高效液相色谱法、气相色谱法、薄层色谱法、纸层析法、柱层析法、比色法等，最常用的是高效液相色谱法，我国现行国家标准、行业标准均采用此法。这些标准在液相色谱分析前均采用了皂化方法进行提取，该方法时间长而且步骤复杂。

发明内容

本发明的目的在于现提供一种检测橄榄油中天然维生素E含量的测定方法，采用超声法对天然维生素E的提取条件进行优化，并采用高效液相色谱法测定橄榄油样本中天然维生素E的含量，为植物油品质标准提供参考，本发明步骤简单，经济实用，适于推广。

为实现本发明目的，采用的技术方案为：

一种检测橄榄油中天然维生素E含量的测定方法，其特征在于包括以下步骤:

（1）称取：按重量份数计，取橄榄油样品1份，精密称定；

（2）超声提取：加入2~3份二氯甲烷-环己烷-甲醇混合提取剂，超声提取20~25min，将上清液倒出收集；

（3）重复步骤（2）1~2次；

（4）浓缩：将上清液收集，浓缩至干，即得样品提取液；

（5）测定：高效液相色谱测定，采用C18色谱柱，柱温控制在32~34℃，流动相与水体积比为95:1.8~2.0，等度洗脱16~18min，流速控制在1.1~1.3mL/min，二极管阵列检测器检测波长295nm，进样量20μL；

对照品溶液的制备：取维生素E对照品，制成每1ml含3μg、6μg、12μg、30μg、60μg的对照品溶液；

高效液相色谱测定法：不同浓度的对照品溶液分别以20μL进样，测得295nm波长下维生素E的峰面积，以所得各标准对照品峰面积为纵坐标，各对应标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线，分别计算维生素E的线性回归方程；然后对样品提取液溶液进行高效液相色谱测定，得到295nm波长下维生素E的峰面积，根据各自的标准曲线计算样品提取液中维生素E的含量，并结合橄榄油样品的质量，经计算得到维生素E的含量。

进一步地，所述步骤（2）二氯甲烷-环己烷-甲醇混合提取剂中二氯甲烷、环己烷、甲醇的质量比为1：（2~3）：（2.5~4）。

进一步地，所述步骤（5）中流速控制在1.2mL/min。

进一步地，所述步骤（5）中柱温控制在33℃。