[发明专利]冬麦种子胚芽活性多肽营养素的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及营养素，尤其是涉及冬麦种子胚芽活性多肽营养素的制备方法，所述冬麦包括冬小麦、冬燕麦、冬裸麦等。

背景技术

春化处理，是植物(胚)感受大自然温度湿度的一种机能，许多冬性植物接受春化处理后，不仅提高了对胚乳的营养利用率、发芽率、种子活性、种子产量、抗病虫害能力，而且缩短了苗穗期，限制了主茎的顶端生长优势，促进分蘖能力，促进营养生长向生殖生长的转化；同时，提高了抵抗自然不利条件的能力，例如抗旱、抗寒、抗涝、抗高温等。此外，春花处理过的种子，可以把春花效果转移至没有春花处理的种子里，让没有严格春花处理的种子得到春花的效果。

中国专利CN1383745公开一种酪蛋白及其复合营养素，该营养素由酪蛋白、酪蛋白复合多肽、低聚糖、磷脂、微量元素、维生素和可食用的载体和/或赋形剂制成；该发明以酪蛋白为基质在其中添加具有多种生物活性的多肽,使该发明具有延缓衰老、调理肠道、抗诱变、可全面促进营养素吸收。

中国专利CN102524514A公开一种从脱脂小麦胚芽粉中提取活性多肽的方法及应用,该方法通过复合蛋白酶对脱脂小麦胚芽粉进行水解,得粗制多肽液,然后进行脱色,滤纸过滤,微滤膜过滤,纳滤膜过滤,得多肽浓缩液,再通过大孔树脂柱处理得产品。

中国专利CN102150910A公开一种小麦胚芽饮料,主要由小麦胚芽蛋白酶解制备的小分子肽、维生素E和二十八烷醇组成。制备方法：1)将小麦胚芽蛋白提纯,并经二级酶解制成小分子肽溶液；2)采用超临界CO₂萃取和分子蒸馏技术,从小麦胚芽中萃取和制备维生素E；3)采用超临界CO₂萃取和多重结晶技术,从小麦胚芽中萃取和制备二十八烷醇；4)加入吐温80,将维生素E和二十八烷醇制备成乳剂；将小麦胚芽的主要营养成分维生素E、二十八烷醇、小麦胚芽蛋白分离提纯,通过酶解技术制备小分子肽,将维生素E、二十八烷醇制成乳剂,按一定比例将三种营养成分重新组合,配以辅料,制备出具有抗疲劳、抗氧化、抗高血压等功能的小麦胚芽饮料。

中国专利CN101513218公开一种从小麦胚芽中提取抗氧化活性小肽营养粉的方法,其步骤为：小麦胚芽粉碎后经萃取将其中的非蛋白除去,然后加入蛋白酶和肽酶后得到小肽营养液,最后浓缩、干燥得到小肽营养粉。

中国专利CN102168124A公开一种复合酶结合碱法制备小麦胚芽活性多肽的方法。该方法以脱脂小麦胚芽为原料,首先对其进行脱糖,脱糖后离心分离；得到的固形物用复合酶对其进行水解,然后调节溶液的pH8～9进行碱提,碱提后进行离心分离；离心分离后上清液通过膜进行分离,通过最小分子量膜的液体再进行透析脱盐；各级分离物采用双效浓缩后喷雾干燥得到不同分子量的生物活性肽粉。

发明内容

本发明的目的在于提供一种冬麦种子胚芽活性多肽营养素的制备方法，所述冬麦包括冬小麦、冬燕麦、冬裸麦等。

本发明包括以下步骤：

1)将冬麦浸润；

2)将浸润后的冬麦进行低温处理；

3)将低温处理后的冬麦破碎得细胞浆液，再用EDTA和蛋白酶K处理后保存；

4)将EDTA和蛋白酶K处理后的细胞浆液以胚芽自己的细胞DNA/RNA为扩增的模板，增加DNA/RNA循环扩增的营养元素，设置细胞浆液在模拟的温控环境下培养，35个循环，每个循环温度与时间设置如下：

70℃60s；

40℃60s；

60℃180s；

在温度预先设置好的恒温加热器中完成，加热器放置在旋转式摇床上，得母液；

5)将步骤4)达到预期扩增时间后的母液超声波处理，离心，收集上清液，分离纯化处理，低温(4～18℃)真空浓缩，喷雾干燥后，即得冬麦种子胚芽活性多肽营养素，呈黄色粉状，有青麦苗与发酵特殊气味与滋味。

在步骤1)中，所述浸润可采用无菌开水浸泡24h。

在步骤2)中，所述低温处理可分两阶段进行，第一阶段的温度为0～3℃，第一阶段的处理时间为10～30h，优选24h，第二阶段的温度为7～9℃，第二阶段的处理时间为10～30h，优选24h，低温处理可循环4～6，最好5次。

在步骤3)中，所述破碎可采用匀浆机破碎，匀浆机的胶体磨细度1～7μm,1.1KW；经破碎后的细胞浆液保持原细胞结构；

所述EDTA的摩尔浓度可为0.005～0.01mol/L；所述蛋白酶K的质量浓度可为50μg/ml，蛋白酶K可用50mMTris-HCL,10mMCaCL₂pH7.5缓冲液配制；