[发明专利]一种牛羊腐蹄病油乳剂疫苗及其制备方法

说明书

一种牛羊腐蹄病油乳剂疫苗及其制备方法，所述油乳剂疫苗由油相与水相按重量份比为1.5～3∶1，加入0.01％硫柳汞溶液构成，其中，所述油相由高压灭菌的药用白油、10％的Span‑80白油混合液、10％的甘露醇单油酸酯白油混合液按照1.8～2.2∶1∶1的比例构成；所述水相将4％～7％的蔗糖酯溶于含10％吐温80和10％聚氧乙烯蓖麻油衍生物水溶液，然后与抗原溶液按照1:2.5～3的比例构成；所述抗原溶液是将坏死梭杆菌经过坏死梭杆菌传代培养培养基传代，坏死梭杆菌扩大培养培养基放大培养后，进行浓缩，灭活得到每毫升菌液菌数不低于4×10¹⁰CFU的菌液。本发明还包括油乳剂疫苗的制备方法。本发明具有低粘度、良好稳定性、免疫效果好、临床不良反应小、成本低的特点。

技术领域

本发明涉及一种牛羊腐蹄病疫苗及其制备方法，具体涉及一种牛羊腐蹄病油乳剂疫苗及其制备方法。

背景技术

腐蹄病(Foot rot)是反刍动物的一种常见病，在我国除在东北和西北及西藏、内蒙奶牛的腐蹄病发病率相对较低外，其余地区尤其在南方，奶牛、山羊、绵羊腐蹄病广泛流行，其发病率高达8％～20％，甚至30％～50％。由于不科学的饲养管理、不良的环境条件、产后疾病、遗传等因素造成奶牛和绵羊蹄裂、蹄漏、蹄底或蹄踵溃疡等损伤，降低蹄部抵抗力，最终引发病原菌感染，加重蹄部损伤。而且牛羊腐蹄病治愈率低、淘汰率高，治疗时间长、药费高，治疗期用药导致废弃牛奶而导致经济损失严重。可见，牛羊腐蹄病是困扰奶牛、羊养殖的严重问题。

奶牛和羊腐蹄病的病原有多种，既有需氧菌又有厌氧菌及兼性菌，多数学者认为牛和羊腐蹄病的主要病原是坏死梭杆菌(Fusobacterium necrophorum)和栉瘤拟杆菌(Bacteroides nodosus)，腐蹄病的发生主要是二者共同感染而引起的。其中，坏死梭杆菌是牛羊腐蹄病的最重要病原，可引起多种器官化脓病变(如牛肝脓肿、人的Lemierre’s综合症、脑炎等疾病)和其他偶蹄动物的蹄部感染。坏死梭杆菌属于梭杆菌属(FusobacteriumKnorr 1922)是一种多形性细菌，培养特性严格厌氧，Feldman等报道，在14株从牛的肝脓肿分离出的坏死梭杆菌中，有4种不同的抗原群。

目前，国内外预防牛、羊腐蹄病的发生主要是定期采用硫酸铜、硫酸锌、多聚甲醛或福尔马林等药浴和定期修蹄，减少蹄部损伤等。治疗采用硫酸铜或碘包扎，全身注射抗生素，但由于其蹄部一直接触地面，处于感染状态，治疗效果差。国外有商品灭活疫苗，但因为腐蹄病病原复杂在不同地域使用效果差异大。油乳剂疫苗是国内外疫苗市场上产量最多的灭活疫苗，其免疫性能稳定、生物安全性高、较小的免疫剂量和较少的免疫次数就能达到延长免疫刺激时间，使机体获得足够的保护性抗体。而传统油乳剂疫苗在生产过程中将司班-80加入白油中作为油相，吐温-80、硬脂酸铝加入抗原水溶液中作为水相，二者混合乳化获得的油乳剂疫苗稳定性高，免疫后可获得持久的较高水平的免疫抗体；但是该油乳剂疫苗粘度大，免疫注射引起的应激反应较大，可形成无菌性化脓灶，在接种部位出现肿胀、硬结，或形成肉芽肿，免疫效果差；同时对动物肉制品质量也产生了不良的影响。由此可见，硬脂酸铝含量、油相、水相，油相水相比例、剪切时间、自油的品质是影响油乳剂疫苗黏度的重要因素，油乳剂疫苗存在着菌株大量培养困难、免疫效果以及引起的不良副反应等缺点。因此，探索一种具有低粘度、良好稳定性、免疫效果好、副作用小的牛羊腐蹄病油乳剂疫苗，必将对牛、羊养殖业和我国畜牧业的健康发展具有重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种具有低粘度、良好稳定性、免疫效果好、临床不良反应小、成本低的牛羊腐蹄病油乳剂疫苗及其制备方法。