[发明专利]一种载药胶束形态粒径的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于载药胶束形态测定领域，涉及一种载药胶束形态粒径的测定方法，尤其涉及一种利用CPS圆盘离心式纳米粒度分析仪进行的载药胶束形态粒径的测定方法。

背景技术

聚合物胶束是纳米范围内的药物载体，与脂质体、纳米微球等药物载体相比，具有如下优势：①大分子胶束具有良好的生物相容性，胶束能够有效隔离药物与外部介质，削弱副作用较大的药物对人体的影响；②由于大分子胶束外部有亲水部分的保护，其不易与蛋白质和吞噬细胞吸附和识别，保证了其在血浆和组织中的停留时间，体内循环时间长，稳定性好；③大分子胶束具有被动靶向性，表面修饰靶向基团后具有主动靶向性；④粒径小，狭窄区能够富集渗透；⑤便于制备，保存方便。

胶束粒子的大小影响着其在体内的循环时间、在器官组织中的分布，进入细胞的机理以及细胞摄取动力学等等。例如，尺寸小于200nm的胶束例子比较难被RES系统清楚，而小于5μm的可以通过毛细血管，粒径在10～100nm之间的聚合物胶束能够获得足够长的循环时间，小于200nm的胶束能够通过脾脏中内皮细胞的过滤。因此，对于载药胶束形态的粒径的测定具有非常重要的意义。

CPS圆盘离心式纳米粒度分析仪为圆盘离心式纳米粒度分析仪，采用的是差示离心沉降法进行颗粒粒度的测量和分析。CPS圆盘离心式纳米粒度分析仪在高速旋转的离心转盘中建立起梯度溶液，之后注入待测样品，测定样品的沉降速度，根据斯多克斯定律(StokesLaw)测定样品的粒径。

但是，利用CPS圆盘离心式纳米粒度分析仪测定粒径时，要求待测样品大于梯度溶液密度，且具有较大的密度差，这样才能保证顺利发生沉降，测定出沉降速度。而对于载药胶束形态，密度一般较小，采用常规的CPS圆盘离心式纳米粒度分析仪无法获得其粒径大小。

本领域需要开发一种能够快速测定载药胶束形态粒度的方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种载药胶束形态粒径的测定方法，所述方法采用常规的CPS圆盘离心式纳米粒度分析仪，即可读取载药胶束形态粒径。

本发明具体通过如下技术方案实现：

一种载药胶束形态粒径的测定方法包括如下步骤：

(1)配制氯化铯梯度溶液，所述氯化铯梯度溶液的平均密度为ρ_p；向CPS圆盘离心式纳米粒度分析仪的低密度扩展盘由高浓度向低浓度依次注入氯化铯梯度溶液，建立梯度；

(2)待梯度溶液梯度稳定后，将待测载药胶束溶液从低密度扩展盘边缘上样至CPS离心粒度仪，测定待测载药胶束的沉降速率，获得载药胶束的形态粒径；

其中，所述氯化铯梯度溶液的最低密度大于载药胶束密度。

本发明通过改变载药胶束的上样位置，获得了载药胶束在梯度溶液中的沉降速度，进而得到载药胶束的形态粒径。

本发明所述氯化铯梯度溶液的平均密度为1.1～1.5g/mL，例如1.2g/mL、1.3g/mL、1.4g/mL等，优选1.25g/mL。平均密度太大，会降低测试粒径的分辨率；若平均密度太小，则测试时间会太长。

本发明所述氯化铯梯度溶液的梯度个数为7～11，例如8、9、10，优选9。

本发明所述待测载药胶束的密度为ρ_s，ρ_p-ρ_s≥0.1g/mL。0.1g/mL以上的密度差，在高速离心过程中，能够有效实现载药胶束的运动轨迹的测定。

本发明所述待测载药胶束溶液的浓度为1.25～100mg/mL，例如1.5mg/mL、8mg/mL、25mg/mL、40mg/mL、530mg/mL、60mg/mL、70mg/mL、85mg/mL、90mg/mL等。

本发明所述CPS圆盘离心式纳米粒度分析仪的转速≥20000转/min，例如25000转/min、28000转/min、30000转/min、33000转/min等。转速太小，对于测试小粒径的胶束来说，会大大增加测试时间。

本发明所述CPS圆盘离心式纳米粒度分析仪的离心时间≥30min，例如35min、42min、50min、65min等。所述离心时间根据待测载药胶束密度和梯度溶液平均密度的差值增大而缩短，此外，加大离心转速，会缩短测试时间。

本发明步骤(2)所述上样量为90～110μL，例如93μL、96μL、99μL、103μL、108μL等，优选100μL。

作为优选技术方案，本发明所述一种载药胶束形态粒径的测定方法包括如下步骤：