[发明专利]一种类风湿因子检测试剂

说明书

技术领域

本发明涉及临床体外检测试剂技术领域，具体涉及一种准确度好、线性范围宽的类风湿因子检测试剂。

背景技术

类风湿因子（rheumatoidfactor，RF）检测在临床上是比较常用的检测项目，主要用在对自身免疫性疾病的诊断，特别是对类风湿关节炎的诊断。类风湿因子（RF）是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体，是由于溶血性链球菌或其它细菌的代谢产物、慢性病毒等感染因子所引起的。RF最初由Rose和Waller（1984年）在类风湿性关节炎（RA）患者血清中发现。RF主要为19S的IgM，它与天然IgG结合的能力较差，最易与人和动物的变性IgG或免疫复合物中的IgG结合。有研究表明RF阳性率在正常人中只有2%，在老年人中是5%，而在RA患者体内可高达80%，因此普遍认为RF是RA患者体内发现的最有诊断价值的自身抗体，RA患者的RF越高，病越严重。

目前，类风湿因子的检测方法主要有胶乳凝集法、双抗原夹心ELISA法、免疫比浊法等。其中乳胶凝集法易受血脂等因素的影响，干扰因素较多，重复性不好，灵敏度及特异性不高，具有较高的假阳性，且只能进行定性或半定量测定，具有明显的局限性和缺陷。双抗原夹心ELISA法可对各种RF分子进行精确测定，但也存在耗时长，步骤多容易造成较大误差，存在假阳性和假阴性等缺点。免疫比浊法的优点是反应速度快，可以标准化，可以使用全自动生化分析仪，适合大批量的自动化操作。免疫比浊法又分为免疫透射比浊法和速率散射比浊法，临床研究表明免疫透射比浊法的抗干扰能力优于速率散射比浊法，同时免疫透射比浊法的速度更快于速率散射比浊法，但免疫透射比浊法在检测高值时出现偏差，线性范围较窄。

目前市面上主要流通的RF检测试剂盒的检测范围在0-80IU/mL，研究表明在RA患者血清中若IgM型RF的效价>80IU/mL，且伴有严重关节功能障碍时，这就表明患者预后不良。因此，提高RF检测试剂盒的检测线性范围是一项十分具有临床意义的项目。

发明内容

本发明针对现有技术的缺点，在免疫透射比浊法的基础上，优化反应体系，提供了一种准确度好、线性范围宽的类风湿因子检测试剂。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

一种类风湿因子检测试剂，是由试剂R1和试剂R2组成的；

所述的，试剂R1是由以下组分组成的：

磷酸盐缓冲液50mmol/L

月桂基咪唑啉甜菜碱1ml/L-5ml/L

双十八烷基二甲基氯化铵0.1ml/L-1ml/L

十二烷基三甲基氯化铵0.1g/L-1g/L

烷基酚聚氧乙烯醚(APEO)2g/L

羟基乙叉二膦酸1ml/L-5ml/L

叠氮化钠0.095%

稳定剂SHE-500.15%

所述的，试剂R2是由以下组分组成的：

磷酸盐缓冲液50mmol/L

热聚合I人IgG30ml/L

胶乳微球5%

Kathon-CG0.05%

烷基酚聚氧乙烯醚(APEO)2g/L

叠氮化钠0.095%。

所述的，试剂R1和试剂R2的体积比为4:1。

所述的，磷酸盐缓冲液的pH为7.4。

本发明所用的胶乳微球来自于上海元升生物有限公司，产品批号为：PS2702。

本发明的试剂在具有双试剂功能的全自动生化分析仪上进行，其具体使用方法如下：加入生理盐水、样本或校准品5μl，之后再加入R1试剂280μl预孵育5min后读取吸光度A1，之后再加入70μl的试剂R2反应5min后，主波长为600nm，读取吸光度A2，并计算ΔA。

本发明的有益效果：

1.本发明的试剂R1中添加入了月桂基咪唑啉甜菜碱、十二烷基三甲基氯化铵和双十八烷基二甲基氯化铵三种表面活性剂，能有较好的提高试剂的乳化作用，从而提高试剂的准确度和特异性；

2.本发明采用新型表面活性剂烷基酚聚氧乙烯醚(APEO)，不仅显著改善试剂的检测性能，而且增强试剂的稳定性和抗干扰能力；

3.本发明的试剂R1中加入了羟基乙叉二膦酸，能够有效的螯合重金属离子，提高试剂的准确性；

4.本发明中的Kathon-CG是一种新型高效环保型广谱杀菌剂、防腐剂，能够有效地增强试剂盒的稳定性，却不会影响试剂的准确度；

5.本发明试剂中的多种试剂协同作用，试剂的准确度和稳定性好，线性范围更宽，价格便宜，使用方便，完全可以满足临床需要。

附图说明