[发明专利]从荠菜中分离纯化的黄酮类化合物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及黄酮类化合物的提取和制备技术领域，具体的说是一种从十字花科荠菜属荠菜中提取分离得到的一种5-羟甲基新黄酮化合物及其制备方法和用途。

背景技术

黄酮类化合物是一类广泛存在于植物界的重要生物活性物质，具有抗氧化、抗衰老、抗病毒、抗肿瘤、抗菌等作用。生物的抗氧化能力与其抗病性、抗逆性及延缓衰老密切相关，因而从天然植物中寻找有效的抗氧化剂应用于医药、食品、保健品、化妆品等中是当前的研究热点之一。

荠菜（Capsella bursa-pastoris），别名护生草、清明草、血压草、粽子菜等。为十字花科荠菜属一年或两年生草本植物，在我国各地广泛分布。现代研究发现，荠菜中含有丰富的生物碱、黄酮、蒽醌、氨基酸、维生素等化学成分。民谣有云 “三月三，荠菜赛灵丹”。近年来，药理学研究发现荠菜具有较好的抗衰老、抗炎、降血压等作用。因此，荠菜是一种极具开发潜力的半野生资源。

目前，荠菜的提取物在国外已被研制成降压药以及治疗各种出血性疾病的药物，而在国内荠菜常被作为野菜或直接入药使用，并未对其有效化学成分进行深入的研究。为了进一步对荠菜这一丰富自然资源进行开发利用，深入挖掘其活性成分，因此本发明选取荠菜作为研究对象，对其化学成分进行系统研究，最终分离得到一种5-羟甲基新黄酮化合物，并用MTT法对其抗肿瘤活性进行了测定。迄今在国内外上尚未见有关于从荠菜中提取该黄酮类化合物及活性相关的文献和专利报道。

发明内容

本发明的目的在于：以药食两用的荠菜为原料，通过工艺简单、提取方便的工艺方法从荠菜中分离纯化出一种新的5-羟甲基黄酮类化合物，并提供了该化合物在制备抗肿瘤药物中的用途。

为实现上述目的，本发明采取了以下技术方案：从荠菜中分离纯化的黄酮类化合物，该黄酮类化合物的化学名称为：2-(3,4-二甲氧苯基)-5-(羟甲基)-7-O-β-D-葡萄糖基-4H-色烯-4-酮，其结构式如下：

一种从荠菜中分离纯化的黄酮类化合物的制备方法，包括以下步骤：

（1）、取干燥的荠菜地上部分作为原料，粉碎后，向其中加入质量浓度为70%的乙醇溶液进行超声提取20-40min，提取结束后进行过滤，收集滤液，并向得到的滤渣中加入质量浓度为70%的乙醇溶液，重复上述超声提取和过滤操作2次，合并所有滤液，减压浓缩至无溶剂，得提取浸膏，备用；

（2）、向步骤（1）得到的提取浸膏中加入蒸馏水，超声分散后得到分散液，之后，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇对分散液进行萃取，并将所得各部位萃取液减压浓缩得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位，备用；

（3）、将步骤（2）所得的乙酸乙酯部位超声分散于水中，过滤后，将得到的滤液过硅胶柱色谱，然后依次用体积比为10:1～2:1的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，得到各洗脱部位，备用；

（4）、收集步骤（3）中体积比为3:1的石油醚-乙酸乙酯洗脱馏分，并将该馏分过硅胶柱色谱，然后依次用体积比为5:1～2:1的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，得到各洗脱部位，备用；

（5）、收集步骤（4）中体积比为3:1的石油醚-乙酸乙酯洗脱馏分，并将该馏分再次过Sephadex LH-20凝胶吸附树脂柱色谱，然后依次用质量浓度为50%～100%的MeOH溶液进行梯度洗脱，将Sephadex柱的质量浓度为75％MeOH洗脱部位通过硅胶柱色谱，以体积比10-8∶3-1∶1的乙酸乙酯-乙醇-水进行洗脱，洗脱液真空浓缩至浸膏状物，并将浸膏状物在50-60℃下真空减压干燥，干燥完成即得淡黄色粉末状，即为从荠菜中分离得到的黄酮类化合物。

所述步骤（1）中，每次超声提取的时间为30min。

所述步骤（3）中，硅胶柱色谱内填料的粒径大小为100-200目。

所述步骤（4）中，硅胶柱色谱内填料的粒径大小为200-300目。

所述的从荠菜中分离纯化的黄酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的用途。

本发明的有益效果：

（1）、本发明的从荠菜中分离纯化的新黄酮类化合物，以市面上常见的药食两用的荠菜为原料，来源丰富、价廉易得，制得的5-羟甲基新黄酮化合物结构新颖，具有明显的肿瘤细胞增殖抑制作用，可作为细胞增殖抑制剂或抗肿瘤剂用于抗肿瘤的研究。具有很好的开发利用价值，为今后临床肿瘤预防和治疗药物的研究开发奠定了基础。