[发明专利]一种甘遂中麻风树烷型二萜类化合物的制备方法

权利要求书

1.一种甘遂中麻风树烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：

(1)制备甘遂粗提物：以甘遂为原料，磨成粉末状得到干燥的甘遂粗粉，甘遂粗粉与乙酸乙酯的料液比按kg/L计1:(8-10)将甘遂粗粉用乙酸乙酯常温下浸泡5h，间歇搅拌，提取1-3次，静置过夜，取上清，过滤，所得滤液进行减压浓缩至干，溶于正己烷-乙醇溶液中，进行减压抽滤，得到甘遂浓度为50-500mg/mL的提取液；

(2)对所得到的提取液进行一维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为50-300mL/针；流动相流速为600mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长200-260nm；梯度洗脱；根据紫外吸收光谱收集目的组分，减压浓缩至干，得到一维液相组分；

(3)用乙醇体积分数为10-50％的乙醇-正己烷二元混合溶剂溶解一维液相组分，溶解至浓度为50-100mg/mL；

(4)进行二维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为0.3-1.0mL/针；流动相流速为10-18mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长200-260nm；梯度洗脱；根据紫外吸收光谱收集目的组分，减压浓缩至干，得到二维液相组分；

(5)用乙醇体积分数为10-50％的乙醇-正己烷二元混合溶剂溶解二维液相组分，溶解至浓度为50-200μg/mL；

(6)进行三维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为10-100μL/针；流动相流速为3-5mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长200-260nm；等度洗脱；根据紫外吸收光谱收集目的组分，减压浓缩至干，得到目的产物。

2.根据权利要求1所述的甘遂中麻风树烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中一维液相色谱分离采用的色谱柱为正相硅胶轴向加压色谱柱，填料为AgelaInnovalsilica——250mm×150mm；10μm,使用时柱温为室温或25-40℃。

3.根据权利要求1所述的甘遂中麻风树烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中二维液相色谱采用的色谱柱为：AcchromX-Amide色谱柱——250mm×20mm；10μm,使用时柱温为室温或25-40℃。

4.根据权利要求1所述的甘遂中麻风树烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤(6)中三维液相色谱采用的色谱柱为：YMC-Pack-Silica色谱柱——250mm×10mm；10μm，使用时柱温为室温或25-40℃。

5.根据权利要求1所述的甘遂中麻风树烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)(2)(4)(6)中减压浓缩采用旋转蒸发仪进行，工艺条件为真空度0.05-0.08Mpa、温度50-60℃。

6.根据权利要求1所述的甘遂中麻风树烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：

(1)制备甘遂粗提物：以甘遂为原料，磨成粉末状得到干燥的甘遂粗粉，甘遂粗粉与乙酸乙酯的料液比按kg/L计1:9将甘遂粗粉用乙酸乙酯常温下浸泡5h，间歇搅拌，提取3次，静置过夜，取上清，过滤，所得滤液进行旋转蒸发至干，溶于正己烷-乙醇溶液中，进行减压抽滤，得到甘遂浓度为94mg/mL的提取液；

(2)对所得到的提取液进行一维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为150mL/针；流动相流速为600mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长210nm；梯度洗脱——0-20％B洗脱25min，100％B洗脱8min；根据紫外吸收光谱收集目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到一维液相组分；

(3)用乙醇体积分数为33％的乙醇-正己烷二元混合溶剂溶解一维液相组分，溶解至浓度为95mg/mL；

(4)进行二维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为0.7mL/针；流动相流速为15mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长210nm；梯度洗脱——5-70％梯度洗脱30min，100％洗脱10min；根据紫外吸收光谱收集目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到二维液相组分；

(5)用乙醇体积分数为50％的乙醇-正己烷二元混合溶剂溶解二维液相组分，溶解至浓度为53μg/mL；

(6)进行三维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为20μL/针；流动相流速为4mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长210nm；等度洗脱——10％B等度洗脱16min；根据紫外吸收光谱收集目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到目的产物。