[发明专利]一种利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法在审
| 申请号： | 201510537172.7 | 申请日： | 2015-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN105039314A | 公开（公告）日： | 2015-11-11 |
| 发明（设计）人： | 刘桂祯;黄炯威;劳纬明;刘燕;吴国庆;劳润卓 | 申请（专利权）人： | 开平牵牛生化制药有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 岳龙 |
| 地址： | 529339 广东省江*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 顺磁性 纳米 提取 多核苷酸 方法 | ||
1.一种利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)吸附：向多核苷酸合成反应液中加无机盐，混合均匀，调pH值，在搅拌条件下，依次序加入磁性纳米微球和有机溶剂，继续搅拌10-20min；
(2)沉降：在外部磁场作用下，沉降10-20min，收集沉降的磁性纳米微球；
(3)洗涤：向步骤(2)收集到的磁性纳米微球中加入有机溶剂，搅拌10min后，在外部磁场作用下，沉降10-20min，收集沉降的磁性纳米微球；
(4)重复步骤(3)操作1次；
(5)洗脱：向步骤(4)得到的磁性纳米微球中加入pH值为5-8的纯化水，搅拌5-10min后，在外部磁场作用下，沉降10-20min，收集洗脱液,即为提取纯化后的多核苷酸溶液。
2.根据权利要求1所述的利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法，其特征在于，按多核苷酸干重计，步骤(1)中多核苷酸合成反应液浓度为1-5％。
3.根据权利要求1所述的利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法，其特征在于，所述的磁性纳米微球为表面修饰硅烷醇基团的超顺磁性纳米微球。
4.根据权利要求1所述的利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法，其特征在于，步骤(1)中无机盐为氯化钠。
5.根据权利要求1所述的利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法，其特征在于，步骤(1)中加入无机盐至无机盐浓度为0.2-0.4mol/L。
6.根据权利要求1所述的利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法，其特征在于，步骤(1)中pH值调至5-6。
7.根据权利要求1所述的利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法，其特征在于，步骤(1)中有机溶剂为甲醇、乙醇或异丙醇，浓度为100％；步骤(3)中有机溶剂为体积分数为70-80％的乙醇。
8.根据权利要求1所述的利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法，其特征在于，步骤(1)中加入的磁性纳米微球与多核苷酸干重的质量比为(1-2):(1-5)。
9.根据权利要求1所述的利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法，其特征在于，步骤(1)中有机溶剂与多核苷酸合成反应液的体积比为(1-2):1，步骤(3)中加入的有机溶剂与步骤(1)中的多核苷酸合成反应液的体积比为(2-4):1。
10.根据权利要求1所述的利用超顺磁性纳米微球提取多核苷酸的方法，其特征在于，搅拌速度为60-100RPM。
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