[发明专利]胶原蛋白匀浆消化方法在审
申请号: | 201510533716.2 | 申请日: | 2015-08-27 |
公开(公告)号: | CN105063147A | 公开(公告)日: | 2015-11-18 |
发明(设计)人: | 杨中万;彭天骥;张鹰;黄海军;田会全;刘建军;孙淑娟;陈云声 | 申请(专利权)人: | 长春博泰医药生物技术有限责任公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06 |
代理公司: | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人: | 白冬冬 |
地址: | 130012 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胶原 蛋白 匀浆 消化 方法 | ||
技术领域
本发明属于生物技术领域。
背景技术
现有胶原蛋白的生产初期,均需要对动物皮、骨骼等进行细化处理,为了后期生产胶原蛋白的含量和纯度,前期的处理极其关键,目前常规对动物皮中提取胶原蛋白的处理方法比较简单,仅仅是将动物皮绞碎,制作成糊状,简单去杂即进行胶原蛋白的提取,此种方法运用到胶原蛋白的生产中,不但造成极大的浪费,而且排杂不彻底,最终可能有许多杂质混入胶原蛋白中。
发明内容
本发明的目的是提供通过精细工艺,将动物皮进行绞碎后进行详细的消化处理,用于后续提取更加高纯度胶原蛋白的胶原蛋白匀浆消化方法。
本发明的步骤是:
a、把成糊状的绞碎皮颗粒用小铁勺转移到组织捣碎机的玻璃杯中3勺,约50毫升,加入10倍体积的超纯水,按组织捣碎机的操作规程匀浆3次,至完全悬浮,将组织匀浆转入塑料桶;
b、所有组织颗粒绞碎均匀后将塑料桶加入超纯水至组织的含量为25克/升,混匀;
c、加冰醋酸至组织悬浮液塑料桶调制溶液浓度0.5毫克/毫升;
d、称取胃蛋白酶,将胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液,然后转入到组织匀浆液至0.1mg/ml,即每100ml匀浆中加入1ml的胃蛋白酶溶液,混匀,室温消化7-10天。
本发明工艺简单,操作容易,本发明不但去除了胶原蛋白生产前期多余的杂质,而且进一步对绞碎动物皮进行更加完美的捣碎匀浆,制作出的匀浆液为后期胶原蛋白的生产提供高纯度保证。
具体实施方式、
本发明的步骤是:
a、把成糊状的绞碎皮颗粒用小铁勺转移到组织捣碎机的玻璃杯中3勺,约50毫升,加入10倍体积的超纯水,按组织捣碎机的操作规程匀浆3次,至完全悬浮,将组织匀浆转入塑料桶;
成糊状的绞碎皮颗粒是现有常规工艺简单将动物皮绞碎工艺而成,本发明的工作是在此基础上继续进行捣碎去杂工作;经过此步的反复捣碎,将皮颗粒稀释并完全悬浮与液体中;
b、所有组织颗粒绞碎均匀后将塑料桶加入超纯水至组织的含量为25克/升,混匀;经过捣碎后,继续稀释;
c、加冰醋酸至组织悬浮液塑料桶调制溶液浓度0.5毫克/毫升;通过加入冰醋酸调节溶液的酸性,使其pH值至2.0~3.0;
d、称取胃蛋白酶,将胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液,然后转入到组织匀浆液至0.1mg/ml,即每100ml匀浆中加入1ml的胃蛋白酶溶液,混匀,室温消化7-10天。胃蛋白酶溶液加入到上面调好的组织悬浮液中,能够将自然三螺旋结构形态的胶原纤维消化成分子量30万左右的胶原蛋白分子,同时切除胶原蛋白分子的氨基和羧基末端(末端肽)的球状区域,并保持了胶原蛋白天然的空间螺旋区段结构和生物活性,从而去除了胶原蛋白的潜在免疫源性。
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