[发明专利]一种白术多糖-芽孢杆菌发酵液的制备方法与应用有效
申请号: | 201510518958.4 | 申请日: | 2015-08-21 |
公开(公告)号: | CN105112328B | 公开(公告)日: | 2019-03-08 |
发明(设计)人: | 赵晓娜;陈抗;李刚;付荣强;赵彦;孙明珠;陈芳 | 申请(专利权)人: | 山东恩康药业有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P1/04;A23K10/18 |
代理公司: | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人: | 朱家富 |
地址: | 256200 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 白术 多糖 芽孢 杆菌 发酵 制备 方法 应用 | ||
1.白术多糖-芽孢杆菌发酵液在制备增强新城疫疫苗的药物中的应用,其特征在于,所述白术多糖-芽孢杆菌发酵液的制备步骤如下:
将活化后的枯草芽孢杆菌接入白术多糖液体培养基中,在35~38℃条件下发酵培养40~52h,制得白术多糖浓度为0.8~0.9mg/mL的白术多糖-芽孢杆菌发酵液;
所述的白术多糖液体培养基每升组分如下:
白术多糖0.8~0.9g,硫酸铵0.35~0.45g,肉汤180~250mL,水定容至1L,氢氧化钠调pH值7.5~8.5,即得。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述活化后的枯草芽孢杆菌接入量为体积百分比2~4%。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的白术多糖液体培养基每升组分如下:
白术多糖0.8~0.9g,硫酸铵0.4g,肉汤200mL,水定容至1L,氢氧化钠调pH值8.0,即得。
4.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的枯草芽孢杆菌为来源于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏编号为CGMCC NO:1.4255或CGMCC NO:1.3382。
5.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的发酵培养温度为37℃,发酵培养时间48h。
6.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述白术多糖采用如下方法制备:
将白术与水按质量比1:7~9混合,浸泡后,煮沸0.8~1.2h,过滤制得一次滤液和一次药渣;将一次药渣与水按质量比1:(5.5~6.5)混合,煮沸0.8~1.2h,过滤制得二次滤液和二次药渣;将二次药渣与水按质量比1: (5.5~6.5)混合,煮沸0.8~1.2h,过滤制得三次滤液和三次药渣;合并一次滤液、二次滤液和三次滤液,加热浓缩,冷却后离心,然后加入乙醇至乙醇质量浓度为80wt%,醇沉20~28h,离心,干燥,制得白术多糖。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的离心条件均为:3000rpm离心10 min。
8.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的干燥温度为55℃~65℃。
9.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的新城疫疫苗为新城疫IV系弱毒苗。
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