[发明专利]从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法有效
申请号: | 201510512672.5 | 申请日: | 2015-08-20 |
公开(公告)号: | CN105131077A | 公开(公告)日: | 2015-12-09 |
发明(设计)人: | 杨柏华;谢意珍;焦春伟;帅欧;李向敏 | 申请(专利权)人: | 广州普立森生物科技有限公司;广东粤微食用菌技术有限公司 |
主分类号: | C07J71/00 | 分类号: | C07J71/00 |
代理公司: | 广州弘邦专利商标事务所有限公司 44236 | 代理人: | 张钇斌 |
地址: | 510663 广东省广州市高新技术产业开*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 灵芝 孢子 提取 过氧 麦角 方法 | ||
1.从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)制备过氧麦角甾醇粗提物:采用渗漉法或回流提取法对破壁灵芝孢子粉进行提取,所得提取液减压浓缩蒸至干,得到过氧麦角甾醇粗提物A;
(2)中压制备色谱纯化:将步骤(1)制得的过氧麦角甾醇粗提物A用60-95%甲醇水溶液溶解,制得中压制备色谱上样液,进行中压制备色谱纯化,收集含过氧麦角甾醇的流份,减压浓缩至干,得到过氧麦角甾醇浸膏B;
(3)模拟移动床纯化:将步骤(2)得到的过氧麦角甾醇浸膏B用60-95%甲醇水溶液溶解,制得进样液,注入模拟移动床色谱分离系统进一步纯化,过氧麦角甾醇在萃取液中,将萃取液减压浓缩至干,得到富含过氧麦角甾醇的干膏C;
(4)将步骤(3)中富含过氧麦角甾醇的干膏C用乙酸乙酯-环己烷混合溶液加热溶解,转入0-8℃环境中重结晶,过滤并洗涤沉淀得到高纯度过氧麦角甾醇。
2.根据权利要求1所述的从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,渗漉法或回流提取法所用的提取溶剂为乙酸乙酯、环己烷、石油醚中的一种或其任意比例混合物。
3.根据权利要求2所述的从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,渗漉法的浸渍时间为24-48h,浸渍温度为室温,近似等速收集5-10BV的渗滤液。
4.根据权利要求2所述的从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,回流提取法的液固比为6-10,微沸状态下提取1-2h,过滤,重复提取1-2次后合并滤液。
5.根据权利要求1所述的从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,中压制备色谱柱采用30-50μmODS硅胶自填,柱高45cm,上样液的固含量为0.05-0.2g/mL,上样流速为2-5mL/min,上样体积为0.1BV,采用60-95%甲醇水溶液以1.2-2.0BV/h的速度等度洗脱。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,进样液的固含量为0.05-0.2g/mL,模拟移动床色谱分离系统中色谱柱填料为30-50μm粒度的ODS反向硅胶,系统采用8-16支色谱柱串联组成,分成四区,每区有2-4支相同的色谱柱串联,系统参数设置为室温,进样泵流速为3-6mL/min,洗脱泵流速为16-38mL/min,萃取液流速为10-23mL/min,萃余液流速为9-21mL/min,切换时间为10-24min。
7.根据权利要求1-5中任一项所述的从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法,其特征在于,所述步骤(4)中,乙酸乙酯-环己烷混合溶液的用量为干膏C的10-20倍,乙酸乙酯与环己烷的体积比为50:50-10:90,重结晶的时间为36-48h。
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