[发明专利]从海参内脏中提取肽、多糖、皂苷和脂类的方法

说明书

技术领域

本发明涉及海参内脏提取技术领域，具体涉及从海参内脏中提取肽、多糖、皂苷和脂类的方法。

背景技术

刺参(ApostichopusjaponicasSelenka)，也称仿刺参，属棘皮动物门，盾手目(Aspidochirotida)，刺参科(StichopodidaeHaeckel)。全世界约有海参1100余种，其中可食用者有40余种。我国海域有100多种，北起渤海湾，南到围洲岛都有出产。在我国，海参不仅一向被视为具有显著滋补作用的美食佳肴，被列为“八珍之一”，在明代就被作为补益药收入《食物本草》。

为了适应我国城乡居民对海参日益增长的需求和海参育苗、养殖技术的突破，我国海参养殖近年迅速发展，据不完全统计2013年海参的捕捞量超过20万吨，加工过程中，海参内脏(肠)超过4万吨。由于海参内脏(肠)清洗泥沙较困难，因此极大部分未被利用，作为废物排放。候英雪等(2008年)研究净海参肠含水分82.03％，干基粗蛋白含量73.6％。内脏中泥沙的含量约为80％左右。【食品研究与开发，2008，29(10)：61-63】以此计算我国沿海年加工海参过程中废弃的净海参肠达8000吨左右，其中的蛋白质超过1000吨，当然还有多糖和脂类，同样具有海参的功效。据报道海参肠蛋白质中必须氨基酸比例比海参体壁更高，EAA/TAA达40％以上，超过WHO/FAO推荐的优质蛋白质比例。有报道海参内脏(肠)中含的甾醇量较多，特别是繁殖季节，内脏含量比平时高80-200倍。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供一种工艺简单、设计合理的从海参内脏中提取肽、多糖、皂苷和脂类的方法，充分利用海参这种宝贵资源，同时也减少排放海参内脏对滩涂和近海环境造成的污染。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：它的工艺流程如下：

步骤一、从海参体内取出的内脏立即放入沸水中煮制10min以上灭酶，杀死肠道中微生物，取出冷却；

步骤二、将海参内脏(肠)粉碎；

步骤三、内脏碎粒放入20-60目网框内，将网框放入合适容器内的水中，向一个方向搅拌，使肠中的泥沙随着水流的离心力流向网框外，经一定时间后放出泥沙脏水，再放清水洗涤，如此重复3-4次即可将肠内泥沙洗净，收集网框中的净肠供下一步酶解用，也可以用自动洗肠机连续洗涤海参肠碎，获得海参净肠；

步骤四、称取一定量洗净的肠碎，按1∶1-10加纯水，用胶体磨磨浆，调整体系温度40℃-55℃，PH7.0-9.0，加复合蛋白酶(其中10万u/gAs139820％-80％、20万u/g2709碱性蛋白酶10％-50％、胰酶10％-70％、60万u/g木瓜蛋白酶2％-30％、风味酶0.5％-10％)1.0-5.0％(蛋白总量)，搅拌酶解3-6h，升温80℃-95℃灭酶10-25min，离心或板框过滤得清液；

步骤五、将步骤四中的清液经孔径1-8nm膜过滤，其中过滤下来的截留液加纯水3-5次稀释后再过滤，合并透过液，最终截留液含多糖，经脱色树脂脱色，活性炭精制、脱炭得精制液，加辅料，经含量测定可以直接调配海参多糖口服液，或精制液经浓缩干燥得多糖粉；

步骤六、将步骤五中的膜透过液经处理好的大孔树脂柱，流速为1-5BV/h，吸附在树脂柱上的是皂苷和脂类，流出液为肽类和无机离子；

步骤七、将步骤六中的树脂柱上的流出液经电渗析脱去无机离子，活性炭精制、脱炭，得精制液，经含量测定后加辅料、调配得海参肽口服液，或精制液经蒸发浓缩、干燥得海参肽粉；

步骤八、将步骤六中的树脂柱用纯水、10％-50％乙醇液洗涤，60％-90％乙醇液洗脱，流速1-4BV/h，收集洗脱液4-8Bv，回收乙醇得浸膏物，用适量纯水分散，用石油醚脱脂，回收石油醚得脂类，脱脂液用纯水饱和的正丁醇液萃取，回收正丁醇后的残渣真空干燥得皂苷。

采用上述结构后，本发明有益效果为：

1、虽然海参肠是优质蛋白质源，但由于海参肠中有自溶酶和泥沙、粪便，从海参体内取出超过2h会自溶、发臭，加上海参肠较细，只有2mm左右粗，清洗其中泥沙非常费时费力，效率低、费用高，是海参肠一直未被大量利用的主要原因，文献中报导的数据只是为了撰写论文在实验室少量实验的结果，至今尚未有海参肠产业化利用，本发明将海参肠经煮制杀灭自溶酶和微生物后粉碎，然后在自动清洗机中洗净泥沙获得净肠，为海参肠的工业化综合利用成为可能；