[发明专利]高效降解烯酰吗啉的蜡状芽孢杆菌菌株WL08及其应用及使用方法

权利要求书

1.一种高效降解烯酰吗啉的蜡状芽孢杆菌菌株(Bacillus cereus)WL08，其特征在于：其保藏号为CCTCC NO：M 2015399。

2.根据权利要求1所述的高效降解烯酰吗啉的蜡状芽孢杆菌菌株(Bacillus cereus)WL08，其特征在于：该菌株16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

3.一种如权利要求1所述的菌株在降解烯酰吗啉农药残留中的应用。

4.一种采用如权利要求1所述的菌株生产烯酰吗啉残留降解菌剂的方法，其特征在于：包括如下步骤：

1)将蜡状芽孢杆菌菌株WL08斜面保存试管种子，接种至无机盐培养基中，振荡培养至对数生长期，获得菌液；

2)将获得的菌液以10％的体积百分比的接种量接种至含有无机盐培养基的种子发酵罐中，培养至对数生长期，获得种子液；

3)将获得的种子液按照10％的体积比的接种量接种入发酵培养基中，在30～35℃、150～200rpm下发酵培养45-50h，获得发酵液，发酵液的菌数大于3.0×10⁹cfu/mL，将发酵液直接稀释5-20倍作为液体菌剂；或将发酵液用生物碳或硅藻土吸附，形成固体菌剂，调整菌数为1.5×10⁸-2.8×10⁹cfu/g，然后分装为袋装产品。

5.根据权利要求4所述的生产烯酰吗啉残留降解菌剂的方法，其特征在于：在种子发酵罐的培养过程中，无菌空气的通气量为0.40～0.60m³/min，搅拌速度为150～200r/min，温度30～35℃，种子罐的培养时间的培养时间均为45-50h，发酵结束后菌体数量大于3.0×10⁹cfu/mL。

6.根据权利要求4所述的生产烯酰吗啉残留降解菌剂的方法，其特征在于：步骤2)中所述的无机盐培养基与步骤3)中所述的发酵培养基相同，其组成按质量百分比比计算，包括酵母膏0.5％，蛋白胨1％，葡萄糖0.5％，NaCl 1％，其余为水，pH 7。

7.根据权利要求4所述的生产烯酰吗啉残留降解菌剂的方法，其特征在于：步骤1)中所述的无机盐培养基，KH₂PO₄ 0.4g，K₂HPO₄ 0.4g，NH₄Cl 1g，MgCl₂ 0.1g，Na₂SO₄ 1.425g，FeSO₄·7H₂O 0.025g，微量元素液10mL，加蒸馏水定容至1100mL，pH 7.0，高压蒸汽灭菌，121℃，20min；其中微量元素液组成如下：ZnSO₄·7H₂O 1.1g，MgSO₄·H₂O 0.58g，(NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O 0.18g，CoSO₄·7H₂O 0.024g，CuSO₄·5H₂O 0.077g，H₃BO₃ 0.029g，NaNO₃·4H₂O0.074g，蒸馏水1L。