[发明专利]N1,N1-二异丙基乙二胺的高效液相色谱分析方法

权利要求书

1.一种N₁,N₁-二异丙基乙二胺的高效液相色谱分析方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）配制不同浓度的N₁,N₁-二异丙基乙二胺标准溶液，分别加入过量2，4-二硝基氟苯进行衍生化反应，反应结束后对反应液进行高效液相色谱分析，以DNB- N₁,N₁-二异丙基乙二胺峰面积对应N₁,N₁-二异丙基乙二胺浓度绘制标准曲线；

（2）将供试品配成溶液，加入过量2，4-二硝基氟苯进行反应，反应结束后对反应液进行高效液相色谱分析，根据DNB-N₁,N₁-二异丙基乙二胺的峰面积和步骤（1）中的标准曲线计算供试品中的N₁,N₁-二异丙基乙二胺含量。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：还包括定量限和检测限的确定，其方法为：取N₁,N₁-二异丙基乙二胺标准溶液适量，逐级稀释至限度溶液，加入过量的2，4-二硝基氟苯进行反应，反应结束后对反应液进行高效液相色谱分析，考察DNB- N₁,N₁-二异丙基乙二胺峰的信噪比，确定定量限和检测限。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：还包括N₁,N₁-二异丙基乙二胺回收率的测定，其方法为：取适量供试品，加入不同浓度的N₁,N₁-二异丙基乙二胺标准溶液，分别加入过量2，4-二硝基氟苯进行反应，反应结束后对反应液进行高效液相色谱分析，计算N₁,N₁-二异丙基乙二胺的回收率。

4.根据权利要求1～3任一项所述的检测方法，其特征在于：高效液相色谱条件为：

色谱柱： C18柱，规格为 4.6×150mm，5.0μm；

检测波长：360nm；

柱温：35～45℃；

流速：0.8～1.2 ml/min；

进样量：10～20μl；

流动相：乙腈-0.05mol/L醋酸钠溶液。

5.根据权利要求1～3任一项所述的检测方法，其特征在于：所述衍生化反应的温度为45℃～55℃，反应时间为20～40分钟，pH值为8～9。

6.根据权利要求1～3任一项所述的检测方法，其特征在于：所述供试品为阿考替胺、盐酸阿考替胺或盐酸阿考替胺片剂。

7.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：所述流动相中的0.05mol/L醋酸钠溶液与乙腈混合之前，先用稀醋酸调节pH至6.4。

8.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：乙腈与0.05mol/L醋酸钠溶液的体积比为60:40～70:30。

9.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于：所加入的2，4-二硝基氟苯为1%～2%的2，4- 二硝基氟苯乙腈溶液；衍生化反应具体步骤为：取1ml 样品溶液、置5ml棕色量瓶中，加入1～2ml 0.04 ～0.06 mol/L碳酸钠溶液和0.8～1.2ml 1%～2%的2，4-二硝基氟苯乙腈溶液，于45℃～55℃下反应20～40分钟，反应结束后，冷却，用乙腈-水（体积比为50：50）定容到刻度，摇匀。