[发明专利]一种抑制郁金香试管苗玻璃化的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种抑制试管苗玻璃化的领域，特别是一种抑制郁金香试管苗玻璃化的方法。

背景技术

植物组织培养过程中，叶片和嫩梢呈透明或半透明水浸状的培养物称为玻璃化苗，它是组培苗的一种生理失调症状。玻璃化大大降低了试管苗有效增殖系数，严重影响了试管苗质量，造成人、财、物的极大浪费，必须对玻璃化加以控制。

郁金香的试管苗在组培的过程中，经常性的会产生玻璃化苗，给组培带来了很大的影响，增加了试管苗组培的人力物力和财力，现有的抑制玻璃化的方法都是配置一些溶液来抵制玻璃化的进度，效果不是很明显。所以在抑制郁金香试管苗玻璃化的方法上还有待进一步的改进。

发明内容

为解决以上技术问题，本发明提供如下技术方案：一种抑制郁金香试管苗玻璃化的方法，步骤(1)将离体培养中的试管苗去除外皮，用洗洁净冲洗2-3次，置于流动水下冲洗30min，然后用84消毒剂(1:250)浸泡1小时，再用蒸馏水冲洗3次，用1.5％的升汞灭菌20-30min，再用无菌水冲洗7-8次，用无菌滤纸吸干水分；步骤(2)将试管苗进行固体培养，且在培养基中添加琼脂10-20g/L、蔗糖50-80g、间苯三酚0.5-0.8mg/L、氧化镁0.3-0.8g、氧化钙0.1-0.5g；步骤(3)在培养基中加入玉米素2-2.5mg/L，赤毒素3-4mg/L；步骤(4)将试管苗放在通风的自然阳光下培养1-2天。

进一步地，步骤1中的用1.5％的升汞灭菌25min。

进一步地，步骤2中琼脂15g/L、蔗糖80g、间苯三酚0.6mg/L、氧化镁0.5g、氧化钙0.3g。

进一步地，步骤3中玉米素2.1mg/L，赤毒素3.2mg/L。

郁金香的试管苗采用固体培养，在其中添加了琼脂15g/L，可以有效的降低培养基的衬质势，造成细胞的吸水阻遏。同时提高琼脂的整体的纯度，也可以有效的降低玻璃化。

适当的在培养基中加入蔗糖或者加入渗透剂，可以降低培养基中的渗透势，减少培养基中植物材料科获得的水分，造成水分的胁迫。培养基中的相对湿度降低了，可以有效的抑制玻璃化。

在培养基中添加了氧化镁和氧化钙可以有效的对培养基进行一定的吸湿处理，保证干燥的环境，有效的抑制玻璃化。

采用自然的光照培养几天后，光照强度得到了增强，试验可以发现，玻璃化苗放于自然光下几天后茎叶变红，玻璃化逐渐消失，因为自然光中的紫外线可以促进组培苗的成熟，加快木质化，从而有效的减少玻璃化的现象发生。