[发明专利]52型重组人乳头瘤病毒病毒样颗粒及其制备方法有效
| 申请号： | 201510490149.7 | 申请日： | 2015-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN106701796B | 公开（公告）日： | 2021-11-16 |
| 发明（设计）人： | 刘永江;伍树明;高文双;陈晓;张海江;沈迩翠;王雅君;姜绪林;张瑞霞;高俊;张庆峰;陈健平;银飞;刘玉莹;夏丽 | 申请（专利权）人： | 北京康乐卫士生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/37 | 分类号： | C12N15/37;C12N15/70;C12N1/21;C12N7/04;C07K14/025;C07K19/00;A61K39/12;A61K38/16;A61P31/20 |
| 代理公司： | 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 | 代理人： | 欧阳石文 |
| 地址： | 100176 北京市大兴区北京经济技*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 52 重组 乳头 病毒 颗粒 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种HPV52 L1 VLP的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
在重组大肠杆菌中表达如SEQ ID NO.4所示Tag-HPV52 L1的融合蛋白的编码基因，获得所述融合蛋白；
采用蛋白酶SENP1酶切所获得的融合蛋白；
纯化酶切后的蛋白而获得平均粒径10～15nm，PdI0.1的HPV52 L1五聚体蛋白质溶液；
将所述HPV52 L1五聚体蛋白质溶液与组装缓冲液混合，最终获得pH值为5.0～5.9，盐浓度为500～2000 mM，平均粒径52～65nm，PdI0.1的HPV52 L1 VLP。
2.如权利要求1所述的HPV52 L1 VLP的制备方法，其特征在于：所述在重组大肠杆菌中表达所述编码基因采用诱导表达的方式。
3.如权利要求2所述的HPV52 L1 VLP的制备方法，其特征在于：所述大肠杆菌为GI698，ER2566，BL21(DE3)，XA90，B834(DE3)或BLR(DE3)。
4.如权利要求3所述的HPV52 L1 VLP的制备方法，其特征在于：所述重组表达获得的HPV52 L1的融合蛋白通过亲和层析方法纯化后，加入所述蛋白质酶进行酶切，再进行纯化获得纯度98%,平均粒径10～15nm，PdI0.1的HPV52 L1五聚体蛋白质溶液。
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