[发明专利]肺动脉高压治疗药物的干细胞筛选模型及应用

说明书

本发明属于应用干细胞技术建立肺动脉高压新型治疗药物筛选的技术，以BMP信号下游关键基因Id1基因为靶点，设计双报告基因原件插入Id1基因组构建重组载体，并转入人胚胎干细胞株，获得稳定表达的CGMCC11091的细胞株，将待测抗肺动脉高压的化合物刺激CGMCC11091的细胞株，再用细胞裂解液裂解细胞，按基因检测系统所述方法检测荧光素酶表达活性，以Id1启动子驱动的双报告基因表达量作为指标，获得对Id1表达上调的治疗肺动脉高压化合物的筛选模型，本发明还包括模型在上调骨形态形成蛋白(BMP)信号的调节剂；上调骨形态形成蛋白II型受体表达水平的调节剂；改善肺动脉血流动力学的制剂；改善肺血管重构的制剂；肺动脉高压治疗药物以及心肺血管疾病治疗药物筛选中的应用。

技术领域

本发明属于应用干细胞技术建立肺动脉高压新型治疗药物筛选方法的技术邻域。

背景技术

肺动脉高压(PAH)是由于肺小动脉原发病变而导致的肺动脉阻力增加，是一种少发但高致死率的病症。肺血管阻力进行性升高，最终导致患者右心衰竭而死亡。其主要病理特征是严重肺血管重构，包括内皮功能紊乱和平滑肌细胞增殖所致的小肺动脉内膜纤维化，中膜肥厚，外膜增生，丛样病变及动脉管腔闭塞。在过去20年里包括前列环素和其类似物，内皮素受体拮抗剂，磷酸二酯酶抑制剂在内的几类新药已经批准上市，但3年死亡率仍然在40％左右。并且这些治疗方案主要针对减轻血管紧张而达到治疗效果。因此我们迫切需要研发改善血管重构，延缓肺动脉高压病程，提高患者生存率为目的的药物。

优化设计PAH理性治疗方案应基于对此疾病细胞分子机理的透彻认识。研究表明肺动脉高压中存在着BMP二型受体(BMPRII)表达缺陷和Id基因表达下调[Yang J at alCirculation Reserch 2008,102:1212-1221]。恢复生理水平BMP信号,尤其是血管细胞中Id基因的表达是改善血管重构的肺动脉高压药物的新靶点之一[Yang J at al Am JPhysiol Lung Cell Mol Physiol 2013 15:305(4):L 312-21]。