[发明专利]复合酶法拆分制备旋光纯R－（－）坦索洛新的方法

说明书

技术领域

本发明属于手性化合物制备领域，涉及旋光纯坦索洛新的制备方法，特别涉及以复合酶催化拆分制备R－（－）坦索洛新的方法。

背景技术

盐酸坦索洛新（tamsulosin hydrochloride）化学名称为（R）-(5)[2-[[2-2-氧基苯氧基]－乙基]氨基]丙基]－2－甲氧基苯磺酰胺盐酸盐，是由日本山之内制药公司研发的α1a－肾上腺素受体拮抗剂。1992年7月通过美国FDA批准，1993年首次在日本上市，商品名为FLOMAX，1996年在中国上市，商品名为哈乐（HARNAL），本品可降低前列腺平滑肌张力，改善因前列腺肥大而引起的排尿障碍，临床主治良性前列腺增生。

坦索洛新属于手性药物，它的外消旋体制备方法为已知的方法（CN－102206176A），即将4－甲氧基－3－磺酰胺基苯丙酮与甲酸胺在钯－碳催化下得到关键中间体5－（2－胺基丙基）－2－甲氧基苯磺酰胺，再与2－（2－乙氧基苯氧基）溴乙烷缩合反应，制备成坦索洛新外消旋体（RS）－5－[2－[[2－[2－乙氧基苯氧基]乙基]氨基]丙基]－2－甲氧苯磺酰胺。

目前市场上销售的坦索洛新外消旋体均以化学法来完成拆分和消旋。但是化学拆分法存在收率低，拆分剂消耗大以及反应条件苛刻等缺陷。

发明内容

本发明针对现有技术缺陷，提供了复合酶法拆分制备旋光纯R－（－）坦索洛新的方法，以达到反应条件温和，选择性高和收率高的目的。

为实现上述目的，本发明采取下述技术方案来实现：

坦索洛新的结构式:

坦索洛新的分子式 ： C20N28N2O5S

分子量：408.51

CAS号：106133－20－4

熔点：226－228℃.

坦索洛新的结构式如式Ⅰ所示，为手性化合物。而作为药物应用的坦索洛新需要得到旋光纯的R－（－）坦索洛新然后进一步盐酸化。

因此本发明提供了一种复合酶法拆分制备旋光纯R－（－）坦索洛新的方法，以坦索洛新外消旋体为底物，在固定化重组脂肪酶B和重组消旋酶的耦合作用下进行转化，完成坦索洛新的动态动力学拆分，得到旋光纯R－（－）坦索洛新。

由式Ⅰ所示，坦索洛新的手性中心为一甲基基团，因此本发明选择脂肪酶B(CALB)，消旋酶（海因酶）对其外消旋体的拆分，该酶系具有在疏水性很差的溶剂中仍具有较高的活性。

脂肪酶是一类丝氨酸水解酶通常其活动中心是一个由天冬氨酸－组氨酸－丝氨酸或组氨酸－丝氨酸－谷氨酸组成的三联体，在催化反应中丝氨酸的羧基向底物酯类或酰胺中的羰基碳原子发起亲核进攻，形成酶－酰胺中间体，随后其它亲核试剂如水，胺，醇和过氧化氢等进攻酶－酰基中间休，酶将酰基转移到酰基受体上，而自身复原又可以重复这一过程。

脂肪酶的催化活动中心匹配的对映反应速度高于不匹配的对映实体，实现对外消旋体的拆分，在外消旋动力学拆分的同时，慢反应对应的对映体在催化剂的作用下持续外消旋化，转化为快反应对映体，这样目标产物即单一对映体，理论产率可以达到100%。

动态动力学拆分（DKR）是底物外消旋化和对映体拆分同时进行的过程，底物的一种对映体连续外消旋化最终实现构型翻转，这就是成功的进行DKR的重要组成部分，然而底物的外消旋动力学拆分是各自要特定的反应条件的，因此必须考虑平衡这两方面的因素。

为了解决动力学拆分最大的理论产率问题，需要在动力学拆分方法中增加一个未知反应的对映体的循环过程，主要的方法有分离，对映体的消旋重复拆分，但是分离只是简单的针对反应过的对映体，而没有充分利用底物，只能缩短反应时间，最大理论产率仍然没有改变。由于脂肪酶只能针对一种特定的对映体反应，不能与另一构象的对映体反应，不能改变最大产率只有50%的缺陷。

金属－酶配伍的DKR是近10年来取得很大进展，其中主要是过渡金属配合物与脂肪酶B配伍为主。过渡金属的外消旋有两种方式，1是通过氢转移反应来实现外消旋，2是通过形成π－烯丙基来产生外消旋化作用，其中铑，钯，钌的配合物显示出良好的外消旋催化性能，其理论产率可达100%，但是，过渡金属的价格贵，而且含有残留物。

而本发明选择用消旋酶取代过渡金属，价格低，无残留，收率高。消旋酶的种类繁多，目前主要用于氨基酸的改型即DL的转型上。

作为本发明的一种实施方式，选择脂肪酶为南极假丝酵母(Candida antarctica)产的脂肪酶B(CALB)，消旋酶为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)产的海因酶。