[发明专利]一种丙二酰基人参皂苷Re及其制备方法

说明书

技术领域：

本发明公开一种丙二酰基人参皂苷Re及其制备方法，从人参鲜花蕾中提取和分离丙二酰基人参皂苷Re（M-Re），属于中药单体提取技术领域。

背景技术：

人参皂苷是人参中重要的活性成分，现在已发现的人参皂苷的种类有180余种，其中丙二酰基人参皂苷是在葡萄糖的6″位链接一个丙二酰基，是一类极性大、亲水性强、极易溶于水的酸性皂苷。但是该分子中酰基键极不稳定，很容易发生水解或脱羧反应，成为相应的中性人参皂苷或乙酰化人参皂苷。

现已分离得到的丙二酰基人参皂苷主要有M-Rb1，M-Rb2，M-Rc，M-Rd及M-NR4，已通过液相色谱-质谱联仪等手段检测分析了丙二酰基人参皂苷Re的存在，尚未有人分离得到其单体。

中国专利（申请号200510016845.0，201310046482.X）先后公开了两种分离制备丙二酰基人参皂苷提取物的方法，尚未有对于丙二酰基人参皂苷单体分离制备的专利报道。

发明内容：

本发明提供了一种丙二酰基人参皂苷Re及其制备方法，能够简单、高效、快速提纯丙二酰基人参皂苷Re。

本发明所述的一种丙二酰基人参皂苷Re，具有以下结构式：

分子式：C₅₁H₈₄O₂₁；分子量：1032。

本发明所述的一种丙二酰基人参皂苷Re的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1）提取：将人参鲜花蕾干燥装柱，用80%～100%甲醇或乙醇进行提取，浓缩提取液后低温放置沉降叶绿素；

2）萃取：取浓缩提取液的上清液通过石油醚萃取去除叶绿素；

3）富集：将步骤B的萃取液的下层加入到大孔吸附树脂柱上吸附，先以水洗脱掉提取液中的糖和无机盐类，再以30%乙醇洗脱得丙二酰基人参皂苷Re富集液；

4）中压硅胶柱层析：将步骤C的富集液经硅胶柱层析进行分离纯化，用二氯甲烷:甲醇：水进行洗脱，根据TLC检查图合并丙二酰基人参皂苷洗脱液；

5）制备：将步骤D的洗脱液浓缩后上制备液相，以乙腈水溶液进行洗脱，根据紫外检测器谱图接收洗脱液，洗脱液冷冻干燥，即得丙二酰基人参皂苷单体Re。

作为本发明的优选方案，所述步骤1中的甲醇用量为20～25倍的柱体积，浓缩温度为40℃，所述提取为渗漉提取，所述低温为-10℃下。

作为本发明的优选方案，所述步骤2中萃取次数为3～4次，萃取次数少于3次，叶绿素去除不完全，萃取次数多于4次，浪费溶剂，增加成本。

作为本发明的优选方案，所述步骤3中所用的大孔树脂型号为AB-8、D101B、HPD-300等弱极性大孔树脂中，所用的洗脱溶剂为30%乙醇。

作为本发明的优选方案，所述步骤4中采用体积比为4:1:0.1-3:1:0.1-2:1:0.1的二氯甲烷:甲醇：水进行梯度洗脱，流速为4～8mL/min。

作为本发明的优选方案，所述步骤5中采用以20%乙腈水溶液进行恒梯度洗脱。

本发明的积极效果在于：

提供了一种丙二酰基人参皂苷Re分离方法，将鲜人参花蕾提取液经大孔树脂柱层析、中压柱层析和制备液相分离纯化得到了高纯度的丙二酰基人参皂苷Re，提取纯化中的浓缩温度控制在40℃以下，最后制备液相得到的洗脱液冷冻干燥，保证M-Re不发生降解；提供的一步富集、两步纯化制得的单体M-Re纯度在99%以上，提取工艺简化，操作时间缩短，保证M-Re不因操作繁琐而大量损失，适合放大进行工业化生产。具有分离工艺简便、快速、经济、高效的特点，为进一步探究M-Re的药理活性奠定了基础。

附图说明：

图1本发明所得到的M-Re质谱图；

具体实施方式：

下面将结合附图和具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例中未详述的事项参见中药化学领域的常规工艺。

实施例1：