[发明专利]一种环境激素检测装置及检测方法有效
申请号: | 201510466528.2 | 申请日: | 2015-07-30 |
公开(公告)号: | CN105021689B | 公开(公告)日: | 2017-08-11 |
发明(设计)人: | 刘英菊;郑俭锋;高丹;孙子洪;何祖宇 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学;深圳市清时捷科技有限公司 |
主分类号: | G01N27/48 | 分类号: | G01N27/48 |
代理公司: | 深圳市精英专利事务所44242 | 代理人: | 冯筠 |
地址: | 510000 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 环境 激素 检测 装置 方法 | ||
1.一种环境激素检测方法,其特征在于包括如下步骤:
步骤S1,制备聚多巴胺修饰电极,所述电极是丝网印刷碳电极;
步骤S2,抗原固定:在电极表面滴加抗原溶液,恒温恒湿反应后,用稀释液冲洗干净,之后用氮气吹干;
步骤S3,剩余活性位点封闭:在电极上滴加封闭液,恒温恒湿反应后,用稀释液冲洗干净,之后用氮气吹干;
步骤S4,免疫反应:在电极上滴加第一抗体,恒温恒湿孵育后,用稀释液冲洗干净,之后用氮气吹干;
步骤S5,二抗标记:在电极上滴加第二抗体,恒温恒湿反应后,用稀释液冲洗干净,之后用氮气吹干;
步骤S6,在氰醌/H2O2体系下进行电化学测试,在分析杯中加入1mM的氰醌缓冲液10mL,以0.1V/s的扫描速度在-0.6V到0.8V范围内进行循环伏安扫描1圈,记录还原峰的电流,然后加入预定量的H2O2,磁力搅拌5秒,在相同的参数下以0.1V/S的速度进行伏安扫描1圈,并记录还原峰电流,计算得出加入H2O2前后的还原峰电流的变化量;
步骤S7,制备标准曲线;
步骤S8,水样测试:通过标准曲线法对待测溶液中的待测物含量进行检测。
2.如权利要求1所述的环境激素检测方法,其特征在于,所述步骤S1中,用去离子水将电极的表面冲洗干净并用氮气吹干,接着把电极浸泡到1/15M PBS中,在恒电位+1.7V下活化4min后水洗、吹干,之后在电极上滴加1.0mg/ml的多巴胺溶液5μL,在37℃温度下反应至溶液完全干透。
3.如权利要求1所述的环境激素检测方法,其特征在于,所述步骤S2至步骤S5中,所述抗原溶液、封闭液、第一抗体和第二抗体的计量均为5μL,所述恒温恒湿的条件为37℃下持续1小时,所述稀释液为PBST抗体稀释液。
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