[发明专利]心肌肌钙蛋白I均相酶免疫法测定试剂盒有效
申请号: | 201510465272.3 | 申请日: | 2015-07-29 |
公开(公告)号: | CN105137071B | 公开(公告)日: | 2017-08-11 |
发明(设计)人: | 李锐;吴蓓蕾;唐霞蔚;包晓峰 | 申请(专利权)人: | 温州煦棠生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/566 | 分类号: | G01N33/566 |
代理公司: | 北京君智知识产权代理事务所(普通合伙)11305 | 代理人: | 郑明 |
地址: | 325000 浙江省温州市经济技*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 心肌 肌钙蛋白 均相 免疫 测定 试剂盒 | ||
1.一种肌钙蛋白I均相酶免疫法检测试剂盒,其特征在于该检测试剂盒包括:采用肌钙蛋白I肽段-酶标记物制备的反应试剂;采用针对所述肽段的抗体制备的免疫酶试剂;和纯化人心肌肌钙蛋白I(cTnI)制备而成的标准品;
该试剂盒的试剂是按以下方法制备的:
(1)据肌钙蛋白I(cTnI)氨基酸序列,分别选取氨基端序列2,羧基端序列4和中心区序列3氨基酸序列,获得其相应肽段序列5或8,7或10和6或9,采用多肽合成仪进行合成,反相高效液相色谱法进行分离纯化;
(2)选用酶蛋白作为载体,采用碳化二亚胺将获取肽段与载体共价偶联;该偶联将上述肽段混合后与载体进行标记,或分别与载体进行标记,标记完成后,对混合体系进行分离纯化,获得标记量均一的肽段-酶标记物;
(3)分别将针对上述各肽段的cTnI多克隆抗体与酶相应底物制备成免疫酶试剂。
2.如权利要求1所述肌钙蛋白I均相酶免疫法检测试剂盒,其特征在于该试剂盒中,免疫酶试剂的配方是:缓冲液20mmol/L、酶底物10g/L、cTnI多克隆抗体1g/L,纯水;反应试剂的配方是:缓冲液20mmol/L、cTnI肽段-酶标记物0.1g/L,纯水;标准品的配方是:纯化人心肌肌钙蛋白I(cTnI)5ng/ml、pH=5.8的PBS缓冲液。
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