[发明专利]核酸提取吸管在审

专利信息
申请号: 201510464228.0 申请日: 2015-08-03
公开(公告)号: CN105779277A 公开(公告)日: 2016-07-20
发明(设计)人: 温和心;龙英全;蒋荣华 申请(专利权)人: 温和心
主分类号: C12M1/24 分类号: C12M1/24;C12M1/00;C12N15/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 537100 广西壮*** 国省代码: 广西;45
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摘要:
搜索关键词: 核酸 提取 吸管
【说明书】:

技术领域

发明涉及一个提取核酸装置。

背景技术

当前,分子生物学检测几乎都需要提取样品核酸,核酸提取质量和效率决定着检测结果的成败。核酸提取技术从化学法发展到物理吸附法,虽然技术水平有较大的提升,但都需要高速离心等设备和反复移液、离心等繁琐操作,不利于基层单位和野外作业,这是分子生物学检测技术在基层推广的首要障碍。

传统酚-氯仿法等化学方法提取核酸,该方法虽然提取的核酸得率高,纯度好,效果确实,但要使用到酚和氯仿等有毒有害物质,操作过程要反复开管加液、离心、弃液,频繁更换离心管和吸咀,工作步骤冗长繁杂,致使提取工作效率低下。利用SiO2特异结合核酸的特性发展起来的离心柱提取法,该方法不使用酚和氯仿等有毒有害物质,核酸得率和纯度也优于化学方法,该方法是当前使用的主要核酸提取方法,使用也最广泛。离心柱法提取核酸存在较大不足是离心管需要反复开盖加液、离心、弃液操作,当检测量大时,给操作人员、仪器造成极大工作压力。一体化的核酸提取吸管是在柱离心技术基础上发展而来,将核酸的吸附、洗涤和洗脱功能高度集成于一支吸管中,其原理是将SiO2材料嵌入吸管中,样品经裂解液液作用后被吸入吸管中,途中被SiO2材料过滤,其中只有核酸被牢固地吸附,其它杂质被吹出弃掉,然后反复吸/吹洗涤液除去膜中的其它杂质和盐类,待膜干燥后,吸入洗脱液将膜中的核酸洗脱,得到的洗脱液即为核酸提取液。提取过程不需要离心机等其它设备,操作简单便捷,提取的核酸质量与离心柱法相当,极大地方便工作人员尤其是基层或野外作业人员核酸提取检测。

发明内容

有鉴于此,本发明的目的在于提供一种核酸提取吸管,该核酸提取吸管将核酸的吸附、洗涤和洗脱功能集成于一支吸管中,减少仪器设备的配备、试剂贮存和工作复杂性,从而提高核酸提取工作效率和便捷性。

为实现达到上述目的,本发明采用的技术方案是:一体化的核酸提取吸管,由吸管、环形胶圈、核酸吸附片、长咀小柱、防护帽顺序连接,环形胶圈压紧核酸吸附片,使吸附片紧贴长咀小柱底面,吸管套紧长咀小柱柱体并密封,防护帽套紧长咀小柱。在吸管吹吸作用下,核酸样品及处理液体经长咀小柱,反复进出核酸吸附片,达到过滤杂质、吸附核酸、洗涤和洗脱核酸,达到从样品中提取、纯化核酸的目的。核酸提取吸管提取核酸包括如下具体步骤:S1:用裂解-结合液与样品混匀,裂解10分钟;S2:用核酸提取吸管吸/吹样品裂解-结合液,使液体充分穿过核酸吸附片,反复吸/吹3次,最后把裂解液充分吹出管外;S3:将核酸提取吸管吸入洗涤液约1mL,使洗涤液穿过核酸吸附片,吹弃,重复吸入/吹出洗涤液2次,最后将洗涤液充分吹出,静置5分钟使吸附片干燥;S4:核酸提取吸管吸入洗脱液约100uL,使液体充分浸润吸附片,静置2分钟,将洗脱液吹出至另一洁净塑料管中,洗脱液即为提取纯化的核酸。上述裂解-结合液是高浓度胍盐或其它高盐溶液,洗涤液为70~100%酒精水溶液,洗脱液为纯水或低盐缓冲液。核酸提取吸管及辅助试剂在常温条件下储存和运输,有效期一年。

本发明克服了现有核酸提取技术操作复杂且依赖设备的问题,提取核酸时仅需一支核酸提取吸管中,操作简单快速,不需要其它的仪器设备辅助,提取的核酸质量与其它提取方法相当,可以满足常用分子生物学检测的要求,从而极大地降低了核酸提取难度,解决了分子生物学检测工作中样品前处理难题,尤其是解决了基层单位和野外样品核酸提取的难题。

附图说明

图1是核酸提取吸管分解示意图;

图中,核酸提取吸管分解成五个零件,分别是1、吸球,2、环形胶圈,3、核酸吸附片,4、长咀小柱,5、防护帽;

图2是核酸提取吸管外观示意图

具体实施方式

实施例1图1所示,本发明包括核心零件长咀小柱4,紧贴长咀小柱4底部核酸吸附片3,卡紧核酸吸附片3环形胶圈2,通过密封剂套紧长咀小柱4上部吸球1,套紧长咀小柱4下部防护帽5。

图2所示,使用核酸提取吸管时,摘下防护帽5,通过捏紧-放松吸球1动作交替吸入-吹出样品裂解液、洗涤液、洗脱液。

实施例2核酸提取吸管提取溶液样品核酸

1.分别在核酸提取吸管壁记录样品编号,取裂解-结合液500uL、洗脱液100uL分别置于2只离心管中备用,洗涤液3000mL置于3只离心管中,1000uL/管,备用。

2.取血清样品100uL与裂解-结合液充分混匀,室温作用10分钟;

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