[发明专利]一种快速定量检测病人血液中百草枯浓度的方法

权利要求书

1.一种快速定量检测血液中百草枯浓度的方法，其特征在于，由除蛋白试剂I和试剂Ⅱ，溶剂Ⅲ和百草枯标准品Ⅳ组成，所述试剂I为乙腈，试剂II为20%三氯醋酸溶液，溶剂Ⅲ为双蒸水。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，除蛋白试剂I乙腈和试剂Ⅱ20%的三氯乙酸与血清的比例按照三者体积比1∶1.3∶6，即600μL的样品血清加100μL的乙腈和130μL的20%三氯乙酸溶液，才能达到最好的除蛋白效果。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，还包括百草枯血清校准品，浓度为2-4μg/mL，以健康人血清为基质配制；当检测系统或检测试剂发生改变时，用百草枯血清校准品来校准仪器。

4.权利要求1所述的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)标准曲线绘制配制500μg/mL的百草枯标准溶液，将其用健康人血清逐级稀释为10、5、2.5、1、0.2、0.08、0.005μg/mL的百草枯溶液，与乙腈和20%三氯乙酸溶液按照三者体积比6∶1∶1.3混匀，以12000r/min离心10min，取100μL上清液，加1900μL蒸馏水稀释，12000r/min离心10min取上清，以蒸馏水为空白对照，采用紫外分光光度法进行测定，在257nm测定吸光度值(y)并对质量浓度(x)进行回归，得线性回归方程y=0.0935x+0.2964，其相关系数为R²=0.9955；

2)样品的检测

①取离心好的样品血清600μL，先加入除蛋白试剂溶剂I100μL，再加入配好的试剂Ⅱ130μL，轻轻混匀；12000r/min离心10min；

②取上清液，以蒸馏水调零，在257nm波长下用紫外分光光度仪（或全自动/半自动生化分析仪、酶标仪等）测定吸光度，代入上述方程y=0.0935x+0.2964，得样品血清中百草枯浓度(μg/mL)。