[发明专利]一种再生蚕丝蛋白多肽及其制备和应用

说明书

技术领域

    本发明涉及生物技术多肽制备领域，具体涉及再生蚕丝蛋白多肽制备领域。

技术背景

蚕丝是熟蚕结茧时所分泌丝液凝固而成的连续长纤维，也称天然丝，是一种天然纤维。人类利用最早的动物纤维之一。

在蚕丝纤维的制造过程中产生一些废料，如真丝废丝、汰头、茧衣、绢纺下脚料等，这些材料由于强力较低，无法用于织作蚕丝广泛应用于纤维制造业，因而被丢弃，造成了浪费。为了合理利用这些废蚕丝，研究人员对再生蚕丝蛋白的结构和性能进行了测试分析。结果发现，再生蚕丝蛋白，强度较天然蚕丝小，吸湿能力和抗紫外线性能高于天然蚕丝。 再生蚕丝的这些性能改变对蚕丝纤维的制造是非常不利的。

然而，随着蚕丝的应用领域的拓宽，蚕丝在化妆品领域的功效显得尤为突出。由于蚕丝蛋白质分子特殊的化学结构，具有天然调湿、改善人体皮肤营养、防止皮肤起皱、增强皮肤细胞活力和弹性、促进细胞新陈代谢及维持皮肤正常生理状态的作用。由于，化妆品与纤维制造的需求不同，化妆品需要更高的保湿效果，以及抗紫外线的作用，因此，再生蚕丝比天然蚕丝具有更好的吸湿能力和抗紫外线的特点，如果应用于化妆品领域，有起到更好的保湿和防晒的作用。

当再生蚕丝蛋白应用于化妆品时，和天然蚕丝蛋白一样存在分子量较大的问题。较大的分子量的蛋白往往会引起过敏反应，导致皮肤瘙痒。 小分子蛋白质或多肽就不容易诱发免疫变态反应。但是，小分子蛋白质往往会失去原形蛋白质的功效。 因此，如何才能让分解后的蚕丝蛋白小分子既有原蛋白质的功效，且不引起过敏，一直是一个难以协调的问题。

发明内容

发明目的

 针对现有蚕丝蛋白化妆品的现状，发明一种再生蚕丝蛋白多肽及制备和应用，该多肽是利用再生蚕丝制备的多肽，将该多肽应用于化妆品，其与天然蚕丝蛋白相比，具有更好的保湿和防晒效果。同时，降低原料成本。

技术方案

本发明为一种再生蚕丝蛋白多肽，其序列为LVDDTDRSIGILSGSCAAANV。制备步骤包括（1）将蚕丝废料500g剪碎后， 按照质量/体积=1:1-3加入碳酸氢钠溶液，混匀；（2）将含蚕丝废料的碳酸氢钠溶液在-70-80℃速冻；（3）采用冷冻高速组织匀浆器，将凝固混合物匀浆；（4）匀浆后，煮沸1-2小时；（5）趁热，过滤，取上清；（6）待上清冷却后，调pH值至pH6.0-6.5；（7）离心10000-15000rpm，30-60分钟，得到沉淀物；（8）将沉淀物复溶于pH4.5-5.0缓冲液中，采用固定化酶技术，分解得到分子量为2400-3600Da的多肽，即得。所述的蚕丝废料，其特征在于，可以是真丝废丝、汰头、茧衣、绢纺下脚料等。所述的固定化酶，其特征在于，可以是无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶等。所述的再生蚕丝蛋白多肽，在制备化妆品中的应用。

本发明多肽也可由上海生工合成，纯度98%。

有益效果

 本发明的制备得到的再生蚕丝蛋白多肽，经蛋白质序列测定，序列为LVDDTDRSIGILSGSCAAANV，纯度大于60%。实验表明，该多肽具有保湿和防晒的作用，作用与天然蚕丝蛋白相比，效果更好。抗原实验结果表明，该多肽没有抗原性。同时，实现废物利用，降低原料成本。

具体实施方式

实施例1

将清洗、烘干后的将真丝废丝500g剪碎后， 加入500ml碳酸氢钠溶液，混匀；将含真丝废丝的碳酸氢钠溶液在-70-80℃速冻；采用冷冻高速组织匀浆器，将凝固混合物匀浆；匀浆后，煮沸1小时；趁热，过滤，取上清；待上清冷却后，调pH值至pH6.0-6.5；离心10000rpm，60分钟，得到沉淀物；将沉淀物复溶于pH4.5-5.0缓冲液中，采用固定化的菠萝蛋白酶，分解得到分子量为2400-3600Da的多肽，即得。采用固相蛋白质自动测序仪测定该多肽的序列为LVDDTDRSIGILSGSCAAANV，纯度为68.9%。

实施例2