[发明专利]一种疫苗组合物、试剂盒及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于兽药领域，具体涉及一种含有犬副流感病毒抗原及犬支气管败血波氏杆菌抗原的疫苗组合物，试剂盒，以及其制备方法和应用。

背景技术

犬传染性支气管炎(Canine Infectious Tracheobronchitis,ITB)又称犬窝咳(Kennel cough)，是犬的一种急性高度接触性呼吸道传染病，具有高传染性、危害严重、影响范围广、易引发其他高致死性病原体感染等特点，仅在甘肃省2004-2009年的调查中该病的整体发病率高达34.26％(卢旺银.甘肃省犬窝咳的流行病学调查与防治.畜牧兽医杂志,2010,29(3):49-52)。该病主要引起幼犬突发性阵发性咳嗽并伴有不定量的鼻腔分泌物，常于春秋季节多发，由于犬群中一旦发病，很快引起整窝幼犬发病、咳嗽，故被称为“犬窝咳”。目前，普遍认为该病主要是由犬副流感病毒(Canine parainfluenza virus，CPIV)、犬支气管败血波氏杆菌(Canine Bordetella bronchiseptica，或Bordetella bronchiseptica in dogs,Bb)病原定殖在鼻腔、喉、气管、支气管等部位而引起(Ettinger,Stephen J.,Feldman,Edward C.Texkbook of veterinary internal medicine(4^thEdition).1995,WB Saunders company)。

CPIV属于副粘液病毒亚科副粘病毒属，是单股负链RNA病毒，可感染各种年龄、性别的犬科动物，特别是幼龄犬，主要通过病犬的眼分泌物、唾液、呼吸道分泌物等散播，经呼吸道途径感染，通过损坏犬的上呼吸道组织，引起干咳、尖咳、鼻塞等症状，严重者会引起犬的支气管炎和支气管肺炎，并给其它病原体的感染创造条件。

Bb为波氏杆菌属成员之一，为一种革兰氏阴性、需氧球杆菌，是在 患有支气管炎的犬中最常分离出的细菌，易感染不同品种、年龄、性别的犬科动物，尤其易感4-12周龄犬，并且已有文献报道该细菌可由犬传染给其他种类动物如猫(Dwight CH,Nigel JM,Richard LW,et al.Veterinary microbiology(2^nd Edition).2004,Blackwell publishing)。该菌潜伏期有2-14日，如不与其他病原体共同感染作用，此菌的临床症状通常会持续10日，然而即使感染症状已消失，但此细菌可继续在自然环境中生存6-14周，期间可再传染至易感动物。此菌通过鼻液、唾液、呼吸道分泌物等传播，可通过直接或间接接触感染。此菌感染的临床症状包括黏液鼻塞、深咳、尖咳、干咳、不适，在运动或情绪激动时会加重。若感染第二病毒原体，经常会引起严重支气管肺炎。

国内家庭饲养宠物的数量与日俱增，据不完全统计我国目前仅宠物犬的数量已超过1.5亿只，在许多经济发达城市的宠物数量与居民比例为1:10。因此，对宠物的健康要求越来越高。由于现有疫苗保护率不高，免疫效果不理想，究其原因是因为个别疫苗毒种的免疫原性不强，有的甚至存在毒性恢复、毒力返强、副反应等现象(见中国专利CN103153337A、CN1876181A)。因此，急需研制更为安全有效的抗犬窝咳的疫苗制品。

专利申请CN102343088A公开了一种犬传染性气管支气管炎二联活疫苗及其制备方法，利用分离得到的有较好免疫原性的犬副流感病毒及犬支气管败血波氏菌，纯化后进行传代致弱，获得弱毒株CPIV-CY-c株与菌株Bb-SD25d，作为生产用毒株，制备出二联活疫苗。然而其存在毒性恢复、毒力返强的危险。

专利申请CN101035558A公开了对抗布拉迪斯拉发钩端螺旋体和其他病原体的多联犬疫苗，含犬支气管败血波氏杆菌p68蛋白与其他多种犬病毒的联苗。然而该发明针对犬多种疾病，不能针对犬窝咳(2种疾病)进行针对性治疗。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种疫苗组合物及其制 备方法和应用，该疫苗组合物可以预防和/或治疗犬窝咳。

本发明涉及一种疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括免疫有效量的犬副流感病毒抗原及免疫有效量的犬支气管败血波氏杆菌抗原以及兽医学上可接受的载体；其中，所述犬副流感病毒抗原选自灭活的犬副流感病毒抗原或F蛋白、HN蛋白、M蛋白、NP蛋白、P蛋白、L蛋白中的至少一种，所述犬支气管败血波氏杆菌抗原选自灭活的犬支气管败血波氏杆菌抗原或p68蛋白。