[发明专利]一种鉴别鲤鱼品种的分子标记及利用其进行鉴别的方法在审
| 申请号： | 201510436129.1 | 申请日： | 2015-07-22 |
| 公开（公告）号： | CN104946787A | 公开（公告）日： | 2015-09-30 |
| 发明（设计）人： | 董在杰;曲疆奇;朱文彬;王兰梅 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人： | 殷红梅;张仕婷 |
| 地址： | 214081 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 鲤鱼 品种 分子 标记 利用 进行 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种鉴别鲤鱼品种的分子标记，其特征是采用的引物对为：核苷酸序列为5’-3’；固定引物序列为：5’-GCCGACTTGAAAATGG-3’，随机引物序列为：5’-GGAACCAAACACATGAAGA-3’。
2.采用权利要求1所述分子标记进行鲤鱼品种鉴别的方法，其特征是步骤为：
(1)设计TRAP分子标记引物：设计固定引物序列和随机引物序列；
(2)PCR反应：总体积为15μL，其中Mg2+1.5mmol/L、dNTPs 0.35mmol/L、随机引物6pmol/L、固定引物10pmol/L、含DNA模板60ng、Taq DNA聚合酶1.0U，用灭菌双蒸馏水补足体积；
PCR反应条件为：94℃4min；94℃45s，35℃45s，72℃1min，5个循环；94℃45s，53℃45s，72℃1min，35个循环；72℃10min；
(3)电泳：对步骤(3)的所得PCR产物用质量浓度为8.0％的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离，银染法染色后，拍照记录电泳结果；
(4)结果观察：针对特定鲤鱼品种电泳后样品出现电泳条带，用于鲤品种鉴别、保种和分子辅助选择育种。
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