[发明专利]一株凝结芽孢杆菌在提升蛋鸡产蛋量上的应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其是涉及一株凝结芽孢杆菌在提高蛋鸡在产蛋后期产蛋量上的应用。

背景技术

随着生活水平日益提高，人们越来越关注抗生素、化学药品残留所引发的食品安全和生活健康问题，对无药物残留的绿色畜禽产品的需求越来越多。微生态制剂通过调节促进正常微生物群生长繁殖、抑制致病菌生长繁殖而发挥作用。因突出的预防和保健效果，微生态制剂在畜禽养殖中可替代抗生素、化学药品，实现真正的“绿色、无污染”。

鸡蛋早已成为人们日常生活的必需品。微生态制剂用在蛋鸡养殖中，可以提高蛋鸡健康状态、促进产蛋量。CN 103518980B报道了一种由植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌混合所得到的微生态制剂，使用后，可以提高机体健康程度。CN101715879B报道了一种由酶制剂和屎肠球菌制备的饲料添加剂，能改善鸡只健康状态，提高产蛋水平。CN 103202400B报道了由干酪乳杆菌、植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌复配的微生态制剂，能改善肉鸡、蛋种鸡生产性能。这些报道，证明微生态制剂在绿色养殖中大有可为。

一般来说，鸡群在开产300天后淘汰低产个体，开产500天后产蛋显著下降，必要时需要更新鸡群。如何提升蛋鸡在产蛋后期的产蛋性能，最大化利用饲料，相关研究很少。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本申请人提供了一株凝结芽孢杆菌在提升蛋鸡产蛋量上的应用。本发明用于蛋鸡养殖中，可显著提升蛋鸡在产蛋后期的产蛋性能：提高产蛋量、增加产蛋率，降低料蛋比。

本发明的技术方案如下：

一株凝结芽孢杆菌在提升蛋鸡产蛋量上的应用，所述凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌CCTCC No.M 2011443、地衣芽孢杆菌CCTCC No.M 2012458复配制备 得到提升蛋鸡产蛋量的复合微生态制剂；所述三种菌种的用量分别为：

其余为填充物；

所述凝结芽孢杆菌为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)ZS-007，菌种保藏编号为CCTCC No.M 2015273，保藏日期为2015年5月3日，保藏地点为中国典型培养物保藏中心，保藏单位地址为中国.武汉.武汉大学。

所述复合微生态制剂有效活菌数为1.0×10⁸-5.0×10¹⁰cfu/g，使用量为蛋鸡日采食量的0.1％-1％。

1、凝结芽孢杆菌的筛选

从江苏无锡马山某奶牛养殖场附近的土壤样品称取2g，加入98ml无菌生理盐水，80℃热处理10min后，在37℃摇床上120rpm条件下振荡20min，吸取上清液1ml加入LB培养基中稀释涂布进行菌株分离。通过对菌株进行形态学观察、生理生化实验、16S rDNA分析等手段有效而准确的确定菌种的属种。

最终得到编号为ZS-007的菌种，鉴定为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)。

ZS-007于2015年5月3日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2015273。

2、凝结芽孢杆菌高密度发酵

(1)菌种活化

将凝结芽孢杆菌菌种接种至营养琼脂斜面培养基上，25-37℃下培养24-48hr；然后划线转接于营养琼脂茄子瓶斜面，25-37℃下培养24-48hr。

营养琼脂斜面培养基及营养琼脂茄子瓶的组成均为：蛋白胨10g/L，牛肉膏3g/L，氯化钠5g/L，琼脂15-20g/L，pH7.2-7.4。

(2)摇瓶培养

将活化好的菌种接种至摇瓶中，振荡培养18-30hr。

摇瓶培养基配方：蛋白胨10g/L，牛肉膏3g/L，氯化钠5g/L，pH7.2-7.4。250mL摇瓶装液量为20mL，500mL摇瓶装液量为50mL。

培养条件：摇瓶转速200r/min，温度25-37℃。

(3)种子罐扩培

扩培菌种以用于后期发酵。种子罐培养基组成：蛋白胨10g/L，牛肉膏3g/L，氯化钠5g/L，pH7.2-7.4。种子罐体积10-1000L，装液量50-80％。

培养条件：搅拌转速180-250r/min，通气量0.5-1.0vvm，温度25-37℃，培养时间18-30hr。

(4)发酵罐发酵