[发明专利]一种产低温蛋白酶的耐寒芽孢杆菌菌株

说明书

本发明提供提供一种产低温蛋白酶的耐寒芽孢杆菌菌株FJAT‑24893(Bacillus frigoritolerans)，于2015年02月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.10554。本发明拓宽了蛋白酶的来源，为更多的蛋白酶应用提供了可能。

【技术领域】

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种产低温蛋白酶的耐寒芽孢杆菌菌株。

【背景技术】

低温蛋白酶是由生活在永久低温环境下的低温微生物产生；菌种的选育是蛋白酶生产的基础性工作。迄今，已有很多种微生物能产生低温蛋白酶，目前已发现产低温蛋白酶的主要菌属有绿脓杆菌(Pseudomonas)、黄单胞菌(Xanthomonas)、气单胞菌(Aeromonas)等。

从低温微生物中筛选新的生物活性物质已成为新的研究热点。低温蛋白酶由于在低温环境下具有较高的酶活性,因而在许多需要低温催化的行业中具有潜在的应用价值，例如：低温蛋白酶在工业生产中，可在低温或室温下进行，无需加热和冷却，可以降低成本；低温蛋白酶在洗涤、食品、环境生物修复等方面具有广泛应用前景，有些已用于工业生产。

自70年代以来，有许多实验室在从事低温蛋白酶的研究,已从海水、嗜冷的鱼类和贝类以及高山、南北极泥土等样品中分离到产低温蛋白酶的菌株，但还未见关于能够产低温蛋白酶的耐寒芽胞杆菌的相关文献报道。

【发明内容】

本发明所要解决的技术问题在于提供一种产低温蛋白酶的耐寒芽孢杆菌菌株FJAT-24893(Bacillus frigoritolerans)，于2015年02月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNO.10554。

本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的：

本实验室采集西藏尼玛县甲热布错湖边的土壤，并将采集到的土壤通过分离与筛选得到一株能够产低温蛋白酶的菌株，鉴定该菌株的形态学、生理生化学特征、及测定其16S rDNA序列并进行比对分析，最终鉴定其为耐寒 芽孢杆菌种的一个菌株。

本发明的有益效果在于：提供了一种能够产蛋白酶的耐寒芽孢杆菌菌株FJAT-24893(Bacillus frigoritolerans)，从而拓宽了蛋白酶的来源，为更多的蛋白酶应用提供了可能。

【附图说明】

下面参照附图结合实施例对本发明作进一步的描述。

图1是本发明中PCR产物的1.5％琼脂糖凝胶电泳图。

图2是本发明中酪氨酸的标准曲线图。

【具体实施方式】

本发明一种产低温蛋白酶的耐寒芽孢杆菌菌株FJAT-24893(Bacillusfrigoritolerans)是从西藏尼玛县甲热布错湖边的土壤中分离、筛选出能够产蛋白酶的菌株，从而拓宽了蛋白酶的来源。

为了对本发明进行详细阐述说明，申请人给出了如下具体实施例。

实施例1该菌株FJAT-24893的分离与筛选

(1)样品的采集：取西藏尼玛县甲热布错湖边的土壤，装入无菌采集袋中，置于4℃保存，备用；

(2)分离菌株：取土壤10g于90mL无菌水中，充分振荡后吸取1mL进行梯度稀释，选用稀释度为10^-1，10^-2，10^-3；接着将土壤稀释液涂布于细菌培养基平板上，于15℃下培养3-5d；之后将培养获得的菌落采用连续划线法接种于细菌培养基平板上，于15℃温度下纯化培养72h，获得纯菌株；