[发明专利]一种鱼用白细胞介素佐剂的制备方法和用途

说明书

本发明公开了SEQ ID NO：3所示蛋白质或SEQ ID NO：4所示蛋白质在制备鱼用疫苗的佐剂中的用途。本发明还公开了一种复合佐剂，它含有SEQ ID NO：3所示蛋白质和SEQ ID NO：4所示蛋白质，以及药学上可接受的载体。本发明重组IL‑1β1和IL‑1β2可以有效提高鱼用疫苗的免疫原性，显著提高特异性抗体，可以作为鱼用疫苗的佐剂使用，二者联合使用时的效果明显优于同等剂量下二者单独使用(p<0.05)，可以制备成为复合佐剂，临床应用前景良好。

技术领域

本发明涉及一种鱼用白细胞介素佐剂的制备方法和用途。

背景技术

随着现代水产养殖集约化程度的日益提高，养殖鱼类暴发的疾病所造成的损失越来越严重，鱼类病害已经成为阻碍水产养殖业健康发展的重要因素。预防鱼类病害的传统方法(如化学药品、抗生物等)增强了病原微生物的抗药性，并给环境带来了药物残留等新的问题；自从1942年Duff等科学家成功研制了杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)的全菌灭活疫苗后，鱼类疫苗逐渐成为鱼类疾病更为理想的预防手段。最近几十年来，随着鱼用疫苗的发展和生产应用，与鱼用疫苗紧密相关的鱼用免疫佐剂者也越来越收到重视。

免疫佐剂简称佐剂(Adjuvant)，是指与抗原同时或预先使用，能非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答，增强相应抗原的免疫原性或改变免疫反应的一类物质。佐剂在动物免疫过程中，主要是通过非特异性的物理或化学方式与抗原结合，增强机体免疫系统对抗原的免疫应答反应能力，其作用主要包括：一是增强免疫系统的高效性和持久性，提高动物机体保护能力；二是减少抗原的使用剂量和免疫次数。

“佐剂(Adjuvant)”一词来源于拉丁文Adjuvare。1925年，免疫学家Gaston Ramon等最早研究发现木薯粉、淀粉或琼脂等物质具有增强疫苗免疫效应的作用。1926年，Glenny等最先将铝盐作为白喉外毒素疫苗的佐剂使用，为以后铝佐剂(如氢氧化铝、磷酸铝等)在疫苗上的广泛应用奠定了基础。1951年，Freund等将石蜡液体与羊毛脂以适当比例混合后制作的油包水型弗氏佐剂，已成为目前国内外实验室经典的免疫佐剂。随着鱼类疫苗研究的发展，鱼用合成肽疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗等新型疫苗也逐渐发展起来，与传统疫苗相比，新型疫苗中的抗原纯度较高导致抗原免疫原性下降，诱导机体产生的免疫应答相对较弱，因此就需要配合佐剂使用提高疫苗的免疫原性,以获得更加稳定、长久的免疫保护效应。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种新的免疫佐剂。

本发明首先提供了SEQ ID NO：3所示蛋白质或SEQ ID NO：4所示蛋白质在制备鱼用疫苗的佐剂中的用途。

本发明还提供了SEQ ID NO：3所示蛋白质和SEQ ID NO：4所示蛋白质在制备复合佐剂中的用途。

优选地，所述复合佐剂中，SEQ ID NO：3所示蛋白质和SEQ ID NO：4所示蛋白质的重量配比为1：1。

本发明还提供了一种复合佐剂，它含有SEQ ID NO：3所示蛋白质和SEQ ID NO：4所示蛋白质，以及药学上可接受的载体。

优选地，SEQ ID NO：3所示蛋白质和SEQ ID NO：4所示蛋白质的重量配比为1：1。

本发明还提供了复合佐剂在制备疫苗中的用途。

本发明还提供了一种预防鱼类链球菌病的疫苗，它包括预防鱼类链球菌病的免疫原以及前述复合佐剂。

优选地，所述预防鱼类链球菌病的免疫原的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示。

优选地，SEQ ID NO：5所示蛋白质与前述的复合佐剂的重量比为1:1。

本发明还提供了氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示的蛋白。