[发明专利]G-SERS基底的制备方法及癌细胞检测方法

权利要求书

1.一种G-SERS基底的制备方法，其特征在于：G-SERS基底为银纳米结构-石墨烯-金纳米结构器件，其制备方式如下：

步骤1：金纳米结构的制备：

通过镀膜机电子束蒸镀的方式，超低真空度条件下，将高纯金蒸镀在硅基底上，蒸镀速率0.5-5埃/秒，形成1-10nm厚度的金膜，从而在硅基底上形成不同的金纳米结构；

步骤2：制备石墨烯-金纳米结构基底；

步骤3：银纳米结构-石墨烯-金纳米结构器件的制备：将步骤2中得到的石墨烯-金纳米结构基底置于电子束蒸镀腔中，低真空度条件下，蒸镀速率0.5-5埃/秒，控制时间5-20秒，在石墨烯-金纳米结构基底上蒸镀得到1-10nm厚度的银纳米结构，从而得到银纳米结构-石墨烯-金纳米结构器件。

2.根据权利要求1所述的G-SERS基底的制备方法，其特征在于：步骤1中所述超低真空度为低于8e-7torr，步骤3中低真空度为低于5e-7torr。

3.根据权利要求1所述的G-SERS基底的制备方法，其特征在于：在硅基底上形成不同的金纳米结构为纳米颗粒和/或纳米条。

4.根据权利要求1所述的G-SERS基底的制备方法，其特征在于：步骤2中，制备石墨烯-金纳米结构基底的方法为：将氧化石墨烯溶解在去离子水中形成4-10mg/ml的溶液，将其溶液利用匀胶机甩膜的方式在上述步骤1的基底上形成均匀的氧化石墨烯薄膜，制备成氧化石墨烯-金纳米结构基底，将得到的氧化石墨烯-金纳米结构基底置于高温管式炉中在惰性气体600-1000摄氏度退火处理0.5-2小时，制备成石墨烯-金纳米结构基底。

5.根据权利要求4所述的G-SERS基底的制备方法，其特征在于：成膜条件：低速600转/秒，经历45秒；高速2000转/秒，经历12秒。

6.根据权利要求1所述的G-SERS基底的制备方法，其特征在于：步骤2中，制备石墨烯-金纳米结构基底的方法为：将化学气相沉积得到石墨烯通过快速转移的方式转移到上述步骤1的基底上得到石墨烯-金纳米结构基底。

7.一种癌细胞的检测方法，其特征在于：

步骤A：

将肝癌细胞和正常肝细胞各自培养瓶中的培养液倒出，并用滴管滴加0.05-1毫升的胰酶清洗残留的培养液；接着用去离子水清洗3～5次并倒出；再向培养瓶中加入0.05-1毫升胰酶用于将细胞从培养瓶壁解离下来，并用1～500毫升去离子水将其稀释得到肝癌细胞和正常细胞的稀释液；

步骤B：

分别将肝癌细胞和正常肝细胞的稀释液分别滴加在银纳米结构-石墨烯-金纳米结构G-SERS器件和硅基底上，所述G-SERS基底为权利要求1至6任意一种制备方法所得到的G-SERS基底，将其烘干得到样品：肝癌细胞/G-SERS、正常肝细胞/G-SERS、肝癌细胞/Si和正常肝细胞/Si，用于拉曼检测；

步骤C：

采用雷尼绍inVia拉曼光谱仪，采用1800线/毫米光栅，激发波长514.5nm作为入射光照射上述步骤A的样品得到相应的拉曼光谱；正常细胞/Si和肝癌细胞/Si的拉曼光谱没有任何区别；将肝癌细胞/G-SERS通过与G-SERS器件和正常肝细胞/G-SERS的拉曼光谱对比，由于癌细胞的特异性基团与石墨烯化学作用从而使石墨烯拉曼特征峰发生变化：石墨烯的D峰(～1350cm-1)半峰宽变窄，同时G峰(～1580cm-1)半峰宽变宽，2D峰(～2650cm-1)退化，2G峰(～2980cm-1)增强，并发生了峰形状的畸化；同时在～1200cm-1、～1500cm-1、～3100cm-1处出现一个较强的癌细胞特征峰，这些为癌细胞的检测和诊断提供了可靠的依据，而从而实现对癌细胞的检测和鉴别。