[发明专利]抗肿瘤疫苗佐剂、其制备方法和编码核酸以及抗肿瘤疫苗组合物

权利要求书

1.一种抗肿瘤疫苗佐剂，其为鞭毛蛋白flagelin的氨基酸序列A和热休克蛋白gp96的氨基酸序列B的融合蛋白Flagp96，其中所述抗肿瘤疫苗佐剂具有如下性质：

(1)与Toll-like受体结合，活化抗原提呈细胞，

(2)启动特异性CD8⁺和CD4⁺T细胞免疫应答，和

(3)具有分子伴侣功能，能与细胞内的多肽非共价结合。

2.根据权利要求1所述的抗肿瘤疫苗佐剂，其中所述鞭毛蛋白flagelin来源于鼠伤寒沙门氏菌菌株LT2。

3.根据权利要求1或2所述的抗肿瘤疫苗佐剂，其中所述热休克蛋白gp96来源于人类。

4.根据权利要求1或2所述的抗肿瘤疫苗佐剂，其序列为SEQIDNO：2所示的序列。

5.一种核酸，其编码根据权利要求1-4任一项所述的抗肿瘤疫苗佐剂。

6.根据权利要求5所述的核酸，其为SEQIDNO：1所示的序列。

7.一种制备根据权利要求1-4任一项所述的抗肿瘤疫苗佐剂的方法，其中包括使根据权利要求5或6所述的核酸在细胞表达系统或非细胞表达系统中进行翻译的过程。

8.一种制备根据权利要求1-4任一项所述的抗肿瘤疫苗佐剂的方法，其中包括通过化学合成方式来合成肽的过程。

9.根据权利要求1-4任一项所述的抗肿瘤疫苗佐剂在制备抗肿瘤疫苗中的用途。

10.根据权利要求5或6所述的核酸在制备抗肿瘤基因疫苗中的用途。

11.一种抗肿瘤疫苗组合物，其包括权利要求1-4任一项所述的抗肿瘤疫苗佐剂和肿瘤抗原。

12.根据权利要求11所述的抗肿瘤疫苗组合物，其通过包括以下步骤的方法制备：

(1)将肿瘤细胞经过2-10次反复冻融，释放出抗原，增加暴露抗原的数量，使表位得到增加，从而增强抗原的免疫原性；

(2)引入白喉毒素，作为载体，有效地递送抗原到MHC类分子上；

(3)加入T辅助表位mHSP70407-426，其来自结核杆菌，能诱导Th1的极化反应，同时刺激Th1极化因子的表位；

(4)将所述多种抗原、白喉毒素和T辅助表位mHSP70407-426用戊二醛偶联；

(5)引入所述抗肿瘤疫苗佐剂。

13.根据权利要求12所述的抗肿瘤疫苗组合物，其中所述肿瘤细胞为选自由HCC1599ATCCCRL-2331、HCC1937ATCCCRL-2336、HCC1143ATCCCRL-2321和MDA-MB-468ATCCHTB-132组成的组的至少之一。

14.根据权利要求11所述的抗肿瘤疫苗组合物，其中所述肿瘤抗原为病毒抗原和/或细菌抗原。