[发明专利]一株产木聚糖酶的芽孢杆菌及其应用和筛选方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物及其应用领域，特别是涉及一株产木聚糖酶的芽孢杆菌及其应用和筛选方法。

背景技术

木聚糖酶(1,4-β-D-xylanase；EC 3.2.1.8)是一种重要的工业用酶，在造纸工业、食品、饲料和能源等领域中具有重要的应用价值。木聚糖酶在造纸工业上可作为纸浆漂白助剂，可以提高纸张的白度和强度，减少传统氯化物漂白剂的实用；在动物饲料中添加木聚糖酶，可以降解木聚糖，提高动物对饲料的利用率；在食品工业上，木聚糖酶还可以用于澄清果汁饮料，改良面包松软度。利用木聚糖酶降解木聚糖还可以得到低聚木糖，低聚木糖可以促进人体大肠中益生菌的增殖，改善肠道功能。自然界中，不同来源的木聚糖酶的酶活特性有很大的差异，有着各自特异的最适反应pH和最适作用温度。但是，多数木聚糖酶最适反应pH值在4.0～6.0，较窄的最适反应pH限制了木聚糖酶在工业上的应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提出一株产木聚糖酶的芽孢杆菌及其应用和筛选方法，以克服现有技术中存在的问题。

基于上述目的，本发明提供的产木聚糖酶的芽孢杆菌Bacillus sp.LUX8保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地点为中国.武汉.武汉大学，保藏登记入册的编号为CCTCC NO:2015308，保藏日期为2015年5月17日。

在本发明的一些实施例中，所述菌株发酵生产的木聚糖酶的酶解温度为30～50℃。

在本发明的一些实施例中，所述菌株发酵生产的木聚糖酶的酶解pH为5.0～9.0。

本发明还提供上述产木聚糖酶的芽孢杆菌的应用，将所述芽孢杆菌发酵，收集发酵产物，即得到木聚糖酶。

本发明还提供上述产木聚糖酶的芽孢杆菌的筛选方法，包括以下步骤：

将样品溶解在磷酸缓冲液中，取上清液；

将所述上清液稀释后涂布接种于琼脂平板生长培养基R2A，选择直径中等，形态边缘整齐、中间凹陷，颜色呈灰白色的菌落；

将获得的菌落转接到木聚糖筛选平板培养基上培养，培养后以Gram iodine solution染色，筛选得到木聚糖酶活性最高的菌株，即为芽孢杆菌Bacillus sp.LUX8。

在本发明的一些实施例中，所述琼脂平板生长培养基R2A含有：0.4-0.6g/L酵母提取物，0.4-0.6g/L蛋白胨，0.4-0.6g/L酪蛋白，0.4-0.6g/L葡萄糖，0.4-0.6g/L可溶性淀粉，0.2-0.4g/L磷酸氢二钾，0.4-0.6g/L七水硫酸镁，0.2-0.4g/L丙酮酸钠，10.0-20.0g/L琼脂糖。

从上面所述可以看出，本发明提供的芽孢杆菌Bacillus sp.LUX8是从动物肠胃中分离得到的，于2015年5月17日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地点为中国.武汉.武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:2015308。该菌株生产的木聚糖酶具有宽pH稳定性，pH 5.0～9.0范围内相对酶活均在50％以上，具有较为稳定的木聚糖酶活性。分别用500μg/mL的胃蛋白酶、胰蛋白酶和胶原蛋白酶A，37℃处理1小时对该菌生产的木聚糖酶活性没有显著影响。而且，本发明提供的菌株能将木聚糖酶分泌到胞外，使其容易从培养基中提取，由此得到的木聚糖酶能够在纸浆漂白、动物饲料、食品工业和能源工业中应用。

附图说明

图1为本发明实施例芽孢杆菌LUX8生产的木聚糖酶在不同反应pH下的相对酶活力；

图2为本发明实施例芽孢杆菌LUX8生产的木聚糖酶在不同反应温度下的相对酶活力。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本发明进一步详细说明。

实施例1芽孢杆菌的分离鉴定