[发明专利]一种苍柏袪痛制剂HPLC指纹图谱的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于中药制剂质量检测领域，具体涉及一种苍柏袪痛制剂HPLC（高效液相色谱）指纹图谱的测定方法。

背景技术

苍柏袪痛散组方源于甘肃省名老中医贾奇峰的经典验方，主要由苍术（麸炒）、黄柏、赤芍、防己等多味药组成，具有清热利湿，祛瘀降浊，通络止痛之效。该药临床上常与别嘌醇联合使用，以缓解痛风急性发作期的红、肿、热、痛症状，还可进一步稳定痛风患者血尿酸水平从而控制痛风复发。然而，联合使用的别嘌醇毒副作用大，容易产生皮疹，腹泻、恶心、呕吐、胃痛，手脚麻木、刺痛，过敏性血管炎等不良反应，此外苍柏袪痛散存在容易吸湿结块、药物稳定性差、具有不良气味、患者服用剂量大，导致患者依从性差等缺点，所以新的制剂开发势在必行。

兰州市肺科医院制剂室对该苍柏袪痛散组方进行改进，研制出一种苍柏袪痛制剂，其由以下中药材的有效成分组成：苍术7.5-30重量份、黄柏7.5-30重量份、川牛膝5-20重量份、防己6-24重量份、赤芍6-24重量份、牡丹皮6-24重量份、细辛2.5-10重量份、苦参7.5-30重量份、秦艽6-24重量份、松节7.5-30重量份、萆薢7.5-30重量份、紫草5-20重量份、黄花菜7.5-30重量份、甘草1-4重量份。如何使成批生产的苍柏袪痛制剂达到质量稳定、安全可控，是实现其产业化生产急需解决的问题之一。

发明内容

本发明的目的提供一种苍柏袪痛制剂HPLC指纹图谱的测定方法。

本发明实现上述目的所采用的技术方案如下：

一种苍柏袪痛制剂HPLC指纹图谱的测定方法，包括如下步骤：

（1）所述苍柏袪痛制剂用乙腈-磷酸提取，得到供试品溶液；

（2）供试品溶液上高效液相色谱仪检测得到HPLC指纹图谱，色谱条件为：色谱柱：C18柱，检测波长：284nm，以乙腈-0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱，梯度洗脱时流动相中乙腈的体积比随时间变化为：0-15min，10-18%；15-30min，18-50%；30-35min，50%。

进一步，步骤（1）中乙腈与磷酸的体积比为(36～500:(50～64)。

优选地，所述乙腈与磷酸的体积比为36:64。

优选地，步骤（1）所述磷酸的浓度为0.1～0.2%。

进一步，步骤（1）所述提取的方式为加热回流提取或超声波提取。

进一步，所述苍柏袪痛制剂由以下中药材的有效成分组成：

苍  术    7.5-30重量份      黄  柏    7.5-30重量份

川牛膝    5-20重量份        防  己    6-24重量份

赤  芍    6-24重量份        牡丹皮    6-24重量份

细  辛    2.5-10重量份      苦  参    7.5-30重量份

秦  艽    6-24重量份        松  节    7.5-30重量份

萆  薢    7.5-30重量份      紫  草    5-20重量份

黄花菜    7.5-30重量份      甘  草    1-4重量份。

进一步，所述HPLC指纹图谱特征峰归属的鉴定：

取盐酸黄柏碱、龙胆苦苷、芍药苷、粉防己碱、盐酸小檗碱对照品，用乙腈-磷酸溶解，制成混合对照品溶液；

按苍柏袪痛制剂的中药材组成，分别制备不含黄柏、苦参、秦艽、防己、赤芍的阴性样品，再用乙腈-磷酸提取，得到阴性样品溶液；

将阴性样品溶液以及混合对照品溶液上高效液相色谱仪检测，分别得到阴性样品和对照品的图谱；

根据供试品、阴性样品和对照品的图谱确定HPLC指纹图谱特征峰的归属。

附图说明

图1为对照品、样品、阴性样品的HPLC指纹图谱；

图2样品的HPLC指纹图谱；

图3为10批次样品的HPLC指纹图谱。

具体实施方式

下述实施例只是用于说明本发明而不是限制本发明。实施例中所用的试剂和仪器如未进行特别说明，均为可从一般商业渠道获得的常规试剂和仪器。

实验例：苍柏袪痛制剂HPLC指纹图谱的测定

1 材料和方法

1.1仪器与试药