[发明专利]一种β‑1,3/1,6‑葡聚糖及其制备方法和在制备免疫增强和抗肿瘤的药物和功能性食品中的应用

权利要求书

1.一种β-1,3/1,6-葡聚糖，其特征在于，它从南极褐藻中提取获得，所述β-1,3/1,6-葡聚糖以β-1,3-葡萄糖为主链，以β-1,6-葡萄糖为支链，重均分子量为5~50 kDa；所述β-1,3/1,6-葡聚糖中葡萄糖的含量为90wt% ~ 98wt%，粗蛋白含量0.5%wt -2.5%wt，其余为水分；所述葡聚糖是一种β-D-吡喃葡聚糖，

所述β-1,3/1,6-葡聚糖通过以下步骤制得：

(1) 脱脂：将南极褐藻烘干、粉碎，有机溶剂浸泡、搅拌，得脱脂藻粉；

(2) 水提：所述脱脂藻粉室温下用水搅拌提取得水提液；

(3) 分级：将步骤(2)所得水提液离心，在离心获得的上清液中加入1~3mol/L氯化钙水溶液；搅拌后离心，取上清液进行透析或超滤脱盐，减压浓缩干燥获得粗多糖；

(4) 纯化：将步骤(3)所述粗多糖用蒸馏水溶解，以蒸馏水和氯化钠水溶液为流动相，经过阴离子交换树脂分离纯化，硫酸苯酚法检测，收集水洗脱组分，减压浓缩、冻干，获得所述β-1,3/1,6-葡聚糖。

2.根据权利要求1所述的β-1,3/1,6-葡聚糖，其特征在于，所述南极褐藻为海茸、海笋或雷松藻。

3.权利要求1所述的β-1,3/1,6-葡聚糖的制备方法，其特征在于它包括以下步骤：

(1) 脱脂：将南极褐藻烘干、粉碎，有机溶剂浸泡、搅拌，得脱脂藻粉；

(2) 水提：所述脱脂藻粉室温下用水搅拌提取得水提液；

(3) 分级：将步骤(2)所得水提液离心，在离心获得的上清液中加入1~3mol/L氯化钙水溶液；搅拌后离心，取上清液进行透析或超滤脱盐，减压浓缩干燥获得粗多糖；

(4) 纯化：将步骤(3)所述粗多糖用蒸馏水溶解，以蒸馏水和氯化钠水溶液为流动相，经过阴离子交换树脂分离纯化，硫酸苯酚法检测，收集水洗脱组分，减压浓缩、冻干，获得所述β-1,3/1,6-葡聚糖。

4.根据权利要求3所述的β-1,3/1,6-葡聚糖的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中加入的有机溶剂的体积与藻粉的质量比例为10～20：1，采用浸泡或间歇搅拌脱脂2～8 h，所用有机溶剂为乙醇、丙酮或甲醇溶液之一种或几种。

5.根据权利要求3所述的β-1,3/1,6-葡聚糖的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中加入氯化钙水溶液的体积为提取液体积的1～3倍，透析或超滤所用膜的截留分子量为1000～3000 Da。

6.权利要求1或2所述的β-1,3/1,6-葡聚糖在制备免疫增强和抗肿瘤的药物和功能性食品中的应用。

7.根据权利要求6所述的β-1,3/1,6-葡聚糖在制备免疫增强和抗肿瘤的药物和功能性食品中的应用，其特征在于，所述β-1,3/1,6-葡聚糖浓度为5～100 μg/mL时，具有促进巨噬细胞吞噬中性红的作用。

8.根据权利要求6所述的β-1,3/1,6-葡聚糖在制备免疫增强和抗肿瘤的药物和功能性食品中的应用，其特征在于，所述β-1,3/1,6-葡聚糖浓度为5～100 μg/mL时，具有促进淋巴细胞NO释放的作用。

9.根据权利要求6所述的β-1,3/1,6-葡聚糖在制备免疫增强和抗肿瘤的药物和功能性食品中的应用，其特征在于，所述β-1,3/1,6-葡聚糖用量大于1 mg/kg/day 时，能够有效抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长和肿瘤转移。