[发明专利]一种量子点免疫层析试纸条及其制备方法在审
申请号: | 201510409045.9 | 申请日: | 2015-07-14 |
公开(公告)号: | CN105004869A | 公开(公告)日: | 2015-10-28 |
发明(设计)人: | 王兵;李万寿;杨伟 | 申请(专利权)人: | 济南尧泰生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/94 | 分类号: | G01N33/94;G01N33/558;G01N33/533 |
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地址: | 250100 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 量子 免疫 层析 试纸 及其 制备 方法 | ||
技术领域
本发明属于抗体检测技术领域,尤其涉及一种量子点免疫层析试纸条及其制备方法。
背景技术
瘦肉精是一类药物的统称,主要是肾上腺类、β激动剂、β-兴奋剂(β-agonist),用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎和肺气肿等疾病。瘦肉精学名为盐酸克伦特罗,可治疗人和家畜支气管哮喘。其用量达到治疗量的10倍、连续服药30d,可明显促进动物生长,并增加瘦肉率。如果家畜被喂食了瘦肉精,其多数会沉积在动物的肝脏、肾脏、肺脏等器官中,人食用后会产生严重的不良反应。其如果在人体长期蓄积,对某些疾病患者(高血压、心脏病等)的危险性更大,可能加重病情,甚至导致死亡。量子点是具有纳米尺寸的半导体晶体,拥有许多独特的光学特性,如宽的吸收谱、窄而对称的发射谱,耐漂白、亮度高和荧光寿命长等优点。由于其出色的光物理特性和相对较小的尺寸,可作为荧光探针应用的免疫层析试纸上;对于量子点而言,其最大优点是耐光漂白,有机荧光团在光激发下会发生不可逆装的广致化学反应,最终导致其失去荧光性。在相同的激发光条件下,量子点的光稳定性要比有机染料高几千倍;几乎所有的生物实验都要求实验材料可溶于水,所以要解决量子点的水溶性问题,才能与蛋白偶联,
现有检测技术:
1.生物荧光染料标记抗体检测技术,主要缺点是生物荧光染料有毒性,不稳定,检测过程复杂,时间在30分钟以上,对操作人员的技能要求非常高。
2、ELISA试剂盒检测技术,试剂盒稳定性差,酶促反应对温度、加样、洗板等过程要求很高,不适合现场实验室外检测。
3.金标层析检测卡,满足了现场大样本量的快速筛查,但是对于要求有限量要求的物质来说,无法半定量或定量,只能检测有或无的物质。
发明内容
本发明的目的在于提供一种量子点免疫层析试纸条及其制备方法,旨在解决现有检测瘦肉精的方法存在的操作复杂,检测时间较长,稳定性差和使用受限的问题。
本发明是这样实现的,一种量子点免疫层析试纸条,所述量子点免疫层析试纸条包括:塑料卡壳、吸水纸、样品垫、量子点免疫垫、胶板。
本发明的另一目的在于提供一种量子点免疫层析试纸条的制备方法,所述量子点免疫层析试纸条的制备方法包括以下步骤:
步骤一,通过碳二亚胺盐酸盐活化量子点的羧基,然后偶联抗体,将混合液置于旋转磁力搅拌器上,在37℃下反应6小时,静置过夜;
步骤二,玻璃纤维膜的前处理,用一定量的处理液,均用喷膜,取适量免疫量子点溶液,用0.02mol/L稀释至一定浓度,喷膜干燥;
步骤三,取胶版,铺膜,配置包被样品,包被大板,温育过夜;
步骤四,将吸水纸、样品垫、量子点免疫垫固定在胶板上,采用自动斩切机切成3mm的试纸条,并放入塑料卡壳中,卡盖卡底压紧,最后将做好的试纸卡与吸管干燥剂放入铝箔袋中密封。
进一步,所述偶联时量子点、抗体、碳二亚胺盐酸盐的摩尔比为1∶12∶4200,反应体系为0.1mol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液。
本发明提供的量子点免疫层析试纸条及其制备方法,利用量子点作为荧光探针,与免疫层析技术结合起来,利用量子点免疫荧光检测仪,采用检测线上荧光强度的比值作为参数进行定量,实现了对猪尿液中的瘦肉精残留进行定量检测;量子点耐光漂白,有机荧光团在光激发下会发生不可逆装的广致化学反应,最终导致其失去荧光性,在相同的激发光条件下,量子点的光稳定性要比有机染料高几千倍。本发明的结构简单,操作方便,结果准确,较好的解决了现有检测瘦肉精的方法存在的操作复杂,检测时间较长,稳定性差和使用受限的问题。
附图说明
图1是本发明实施例提供的量子点免疫层析试纸条结构示意图;
图中:1、塑料卡壳;2、吸水纸;3、样品垫;4、量子点免疫垫;5、胶板;6、层析膜;
图2是本发明实施例提供的量子点免疫层析试纸条的制备方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
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