[发明专利]类芽孢杆菌CGMCC No.8333凝乳酶粗提物及制备方法在审
申请号: | 201510408813.9 | 申请日: | 2015-07-13 |
公开(公告)号: | CN105018450A | 公开(公告)日: | 2015-11-04 |
发明(设计)人: | 杭锋;王钦博;刘振民;陈卫;穆海波;王国骄;刘沛毅;洪青;雍靖怡;齐晓彦 | 申请(专利权)人: | 光明乳业股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/52 | 分类号: | C12N9/52;C12R1/01 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 朱水平;沈利 |
地址: | 201103 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 芽孢 杆菌 cgmcc no 8333 凝乳 酶粗提物 制备 方法 | ||
1.一种制备类芽孢杆菌CGMCC No.8333的凝乳酶粗提物的方法,其特征在于,其包括以下的步骤:
(1)将保藏编号为CGMCC No.8333的类芽孢杆菌的种子液以0.4~3.2%的接种量接种于麸皮培养基震荡发酵培养24~72小时得发酵液,所述震荡发酵培养的转速为160~180r/min,所述百分比为体积百分比;
(2)将步骤(1)所得的发酵液离心取上清液即得凝乳酶粗提物。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵培养的时间为48~72小时。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述震荡发酵培养的转速为160~170r/min。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述种子液的接种量为0.8~3.2%,所述百分比为体积百分比。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,将保藏编号为CGMCC No.8333的类芽孢杆菌在种子培养基上进行种子培养获得种子液;所述的种子培养基为TYC培养基;所述种子培养的时间为20小时;所述种子培养的温度为30℃;所述的麸皮培养基包括麸皮和水,所述麸皮的含量为1%~5%,所述百分比为质量百分比;和/或,所述麸皮为小麦麸皮。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵培养的温度为28~30℃;步骤(2)所述离心的时间为15分钟;所述离心的温度为4℃;和/或,所述离心的速度为15000g。
7.一种由权利要求1~6任一项所述的方法制得的凝乳酶粗提物。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的方法还包括以下的步骤:
(3)将步骤(2)所得上清液与硫酸铵混合得混合液,所述混合液中硫酸铵的饱和度为50~75%,静置混合液,离心收集沉淀物;
(4)将步骤(3)所得沉淀物溶解,离心,取上清液,即得凝乳酶。
9.如权利要求6所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述混合液中硫酸铵的饱和度为60%;步骤(3)所述静置的温度为2~6℃;步骤(3)所述静置的时间为0~5小时;步骤(4)中所述的溶解的溶剂为水或PBS溶液;和/或,步骤(4)还包括将步骤(4)所述上清液冻干的步骤。
10.一种由权利要求8~9任一项所述的方法制得的凝乳酶。
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