[发明专利]一种具有多靶点的抗菌多肽偶联物及其二聚物的合成和应用

说明书

技术领域

本发明属于药物化学领域，涉及一种具有多靶点的抗菌多肽偶联物；本发明同时还涉及该抗菌肽在制备抗菌药物中的应用。

背景技术

在人类发展的长河中，细菌感染曾经夺去无数人的生命。自从青霉素问世以来，大量的抗菌药物不断涌现，在细菌感染疾病的治疗中发挥了极大的作用。但是由于抗菌药物的不合理应用，导致细菌耐药频繁发生，甚至耐药倾向性产生的速度远远超出抗菌药物的研发速度。细菌耐药性已经成为全球严重的公共卫生问题。特别是“超级细菌”的出现，使人类面临无药可用的窘境。因此除了规范抗菌药物的使用外，迫切需要开发具有新作用机制并且不受传统耐药机制影响的抗菌药物。

吖啶分子是一个多芳香环化合物，其能够通过插入到DNA中而诱导细胞死亡。目前，已经有多种吖啶类似物被合成，并用于抗细菌、抗疟疾甚至是抗肿瘤研究[Acta poloniae pharmaceutica, 2012;69:3]。早在1912年，Ehrlich和Benda就把吖啶分子运用于抗菌领域。而在1917年，基于吖啶分子的抗菌药物便成功地上到临床研究[Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 2001;47:1]。但是，此后由于青霉素的兴起，占据了抗菌药的主要市场，吖啶类药物就逐渐的离开了人们的视线。但是近些年，由于耐药性细菌的广泛发生，吖啶类药物又引起了人们的广泛关注[The Open Medicinal Chemistry Journal, 2011;5:11]。

核定位序列（NLS，PKKKRKV）是一段有7个氨基酸残基组成的多肽片段，NLS作为病毒SV40的T抗原的一个片段，因其具有转运细胞外活性物质进入细胞核的能力而为人们所熟知[Advanced Drug Delivery Reviews, 2007;59:698]。研究发现，尽管作用机制不清楚，但是NLS对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌都表现出一定的抑制作用[Antimicrobial agents and chemotherapy, 2006;50:1118]。

迄今发现的抗生素基本上都是通过单一作用机制抑杀细菌，这就很容易导致细菌对这类药物产生耐药性。因此发展具有多靶点的抗生素药物对于治疗耐药细菌感染具有重要意义。另外，由于具有多个作用靶点，细菌也不容易对这类药物产生耐药性。

发明内容

为了发展不易受传统耐药机制影响的抗菌药物，针对现有技术中存在的问题，本发明的一个目的是提供一种具有多靶点的多肽偶联物抗菌药物Acr₃-NLS及其二聚物(Acr₃-NLS)₂；

本发明的另一个目的是提供了具有多靶点的多肽偶联物抗菌药物Acr₃-NLS及其二聚物(Acr₃-NLS)₂的合成方法；

本发明还提供一种以抗菌多肽偶联物为活性成分在制备抗菌药物中的应用。

一、具有多靶点的抗菌多肽偶联物及其合成

1、具有多靶点的抗菌多肽偶联物的结构

本发明具有多靶点的抗菌多肽偶联物，是基于吖啶分子Acr和核定位序列NLS构建的具抗菌多肽偶联物Acr₃-NLS，其结构序列如下：

其中所用氨基酸都为L型氨基酸，P为脯氨酸，K为赖氨酸，R为精氨酸，V为缬氨酸，C为半胱氨酸。

2、具有多靶点的抗菌多肽偶联物的合成

本发明具有多靶点的抗菌多肽偶联物的合成，是在具有正电荷多肽序列Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-Cys-NH₂的N端引入侧链含有吖啶基团的赖氨酸（Lys(acridine)）。其具体合成步骤如下：

（1）含有吖啶基团氨基酸Fmoc-Lys(Acr)的合成

a．9-Phenoxyacridine的合成：氩气保护下，使苯酚、NaOH、9-氯吖啶以10:1.5:1的摩尔比，于95~105℃反应1.5~2h，加入NaOH溶液终止反应；然后在室温下静置10~12h，得到黄色沉淀；过滤，水洗，抽干，即得产物9-Phenoxyacridine；

b．Fmoc-Lys(Acr)的合成：氩气保护下，使Fmoc-Lys-OH、苯酚、9-phenoxyacrudine 以1:12:2的摩尔比，于55~65℃反应~5h；用无水乙醚随沉淀，过滤，洗涤，即得产物Fmoc-Lys(Acr)；