[发明专利]正调控香雪兰花朵花色苷合成的MYB 转录因子的cDNA序列

说明书

本发明首次从红花香雪兰花瓣中克隆得到两条正调控花色苷合成的MYB转录因子(FhPAP1L1和FhPAP1L2)的cDNA序列，并推测得到了其编码的氨基序列。在拟南芥和烟草中过量表达FhPAP1L1和FhPAP1L2可以明显地增强植物组织的着色，从而确定其参与正调控植物花色苷合成的功能。

技术领域

本发明属于植物分子生物技术领域，具体涉及红花香雪兰花瓣分离得到的两个具有功能的，与花朵花色苷合成相关的 MYB 转录因子（FhPAP1L1和 FhPAP1L2) 的 cDNA 序列及 其氨基酸序列。

背景技术

影响植物颜色的主要有三大类色素 ：花色苷、类胡萝卜素和甜菜素。人们对于花色苷的研究抱有极大的兴趣，这源于其对植物生理和人类健康起着非常重要的作用。花色苷是由一系列酶催化合成，这些酶则由相对应的结构基因控制，研究表明 ：这些结构基因的表 达由一个复杂转录调控网络调控，其中 MYB 转录因子是 MBW(MYB-bHLH-WDR) 转录因子复合 物的重要成员，它发挥着特异性调节的作用。植物 MYB 转录因子家族是一个具有不同调控 功能的大家族，它们对于激活特定的下游基因的表达发挥重要作用。根据 MYB蛋白保守结 构域的不同，MYB 可以分为 R2R3 MYB 和 R3 MYB 等。

到目前为止，人们已经在很多植物中克隆得到正调控花色苷合成的 R2R3 MYB，如金鱼草，拟南芥，甘蓝，辣椒，甜橙，淫羊藿，山竹，龙胆，非洲菊，甘薯，牵牛，苹果，苜蓿，杨梅，烟草，矮牵牛，西洋梨，沙梨，碧桃，番茄，马铃薯和葡萄等 , 但是这些都属于双子叶植物，在单子叶中只有从百合，蝴蝶兰和玉米中克隆得到了花色苷合成相关的 MYB 转录因子。 本发明中涉及到的 FhPAP1L1和 FhPAP1L2基因是从单子叶植物香雪兰中克隆得到的，编码 与植物花色苷合成相关的 MYB 转录因子，具体说该基因是正调控植物花色形成的转录因 子，能促进花色苷的合成，与花色行成密切相关。

发明内容

本发明首次从红花香雪兰花瓣中克隆得到两条正调控花色苷合成的 MYB 转录因子 (FhPAP1L1和 FhPAP1L2) 的 cDNA 序列，并推测得到了其编码的氨基序列。在拟南芥和烟 草中过量表达 FhPAP1L1和 FhPAP1L2可以明显地增强植物组织的着色，从而确定其参与正 调控植物花色苷合成的功能。

本发明的主要目的是提供已经得到功能验证的编码 FhPAP1L1和 FhPAP1L1的cDNA 序列和由此推断的氨基酸序列。

本发明的技术方案 ：

为了从首次从香雪兰中克隆得到 FhPAP1L1和 FhPAP1L2基因，本发明人首先利用拟南 芥中 PAP1 序列作为诱饵，对实验室已建立的红花香雪兰花朵盛开时期转录组文库进行本 地 Blast，筛选与拟南芥中同源性较高的序列。分离得到了长度为 212bp 的FhPAP1L1片段， 分析该序列显示 ：此片段与 Torenia fournieri的 R2R3 MYB 同源性最高，达到 67%，并且该 片段包含 ATG 起始密码子，随后利用 RACE 法克隆该基因的 3' 端序列，得到包含 TAA 终止密