[发明专利]用于检测EB病毒Rta/IgG抗体的化学发光试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 201510398322.0 | 申请日： | 2015-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN105044355B | 公开（公告）日： | 2016-10-19 |
| 发明（设计）人： | 吴凡;卢晓希;焦守恕;李全 | 申请（专利权）人： | 同昕生物技术（北京）有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/00 | 分类号： | C07K14/00;G01N33/68;G01N33/569;G01N33/532 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 吴泳历 |
| 地址： | 102206 北京市昌平*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 eb 病毒 rta igg 抗体 化学 发光 试剂盒 及其 应用 | ||
1.用于检测EB病毒Rta/IgG抗体的化学发光试剂盒，其特征在于，包括包被有抗His标签单抗的磁颗粒，携带His标签的Rta蛋白，携带His标签的特异性人工多肽及吖啶酯标记的抗人IgG抗体；
所述特异性人工多肽的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。
2.根据权利要求1所述的化学发光试剂盒，其特征在于，所述Rta蛋白为保藏号CGMCC6955的CHO细胞株CHO/RTA表达所得。
3.根据权利要求1所述的化学发光试剂盒，其特征在于，还包括EB病毒Rta/IgG校准品、样品稀释液和洗涤液。
所述EB病毒Rta/IgG校准品为含人EBVRta-IgG的磷酸盐缓冲液；
所述样品稀释液为含0.3MNaCl的50mM的磷酸盐缓冲液；
所述洗涤液为pH值为7.2～8.5，包含有Proclin300和吐温-20的0.01～0.03mol/L的磷酸盐缓冲液，所述Proclin300在所述洗涤液中的终浓度为体积百分比0.02～0.05％，所述吐温-20在所述洗涤液中的终浓度为体积百分比1.0～2.0％。
4.权利要求1-3任一所述的化学发光试剂盒在检测EB病毒Rta/IgG抗体方面的应用。
5.一种检测EB病毒Rta/IgG抗体的方法，其特征在于，进行如下检测步骤：
(1)获取标准曲线和曲线方程，
其横坐标为Rta/IgG校准品梯度浓度数值，纵坐标为以梯度浓度的Rta/IgG校准品进行以下步骤所得的荧光值；
(2)在载玻片上依次滴加工作液1、工作液2，孵育、干燥；
(3)加入经样品稀释液稀释后的待测样品，孵育、干燥；
(4)加入工作液3，孵育、干燥；
(5)经洗涤液洗涤后，将载玻片置于荧光显微镜下观察读数；
(6)读出的荧光值代入所述标准曲线获得待测样品蛋白浓度。
所述工作液1为包被有抗His标签单抗的磁颗粒溶液；
所述工作液2为携带His标签的Rta蛋白及携带His标签的特异性多肽的混合溶液；
所述工作液3为吖啶酯标记的抗人IgG抗体溶液；
所述特异性多肽的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述Rta蛋白为保藏号CGMCC6955的CHO细胞株CHO/RTA表达所得。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述样品稀释液为含0.3MNaCl的50mM的磷酸盐缓冲液；
所述洗涤液为pH值为7.2～8.5，包含有Proclin300和吐温-20的0.01～0.03mol/L的磷酸盐缓冲液，所述Proclin300在所述洗涤液中的终浓度为体积百分比0.02～0.05％，所述吐温-20在所述洗涤液中的终浓度为体积百分比1.0～2.0％。
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