[发明专利]一种用于培养间充质干细胞的培养基

权利要求书

1.一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：该培养基组成包括：(1)经过改良的基础培养基IMDM；(2)细胞生长因子组合；(3)胰岛素；(4)微量元素；(5)脂类物质；(6)维生素类物质；(7)激素类物质；(8)蛋白质分子；(9)氨基酸类物质；(10)其它化合物。

2.根据权利要求1所述的一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：所述(1)经过改良的基础培养基IMDM，是在商售IMDM基础上，添加至少包括生物素(1-50μM)和谷氨酰胺(1-50μM)在内的水溶性化合物；所述可溶性化合物还可包括氯化铬(0.1-10μg/L)、氯化铜(0.1-1mg/L)、氯化锰0.01-0.1mg/L和氯化锌0.1-10mg/L。

3.根据权利要求1所述的一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：所述(2)细胞生长因子组合至少包括碱性成纤维细胞生长因子(bFGF，1-100ng/mL)和表皮生长因子(EGF，1-100ng/mL)，还可包括激活素A(1-100ng/ml)、转化生长因子-β(TGF-β，1-100ng/mL)、骨形成蛋白(BMP，1-100ng/mL)、白血病抑制因子(LIF，1-100ng/mL)、干细胞生长因子(SCF，1-100ng/mL)、肝细胞生长因子(HGF，1-100ng/mL)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1，1-100ng/mL)、促红细胞生成素(EPO，0.1-50U/mL)、血清素(1-100nM/L)、血小板源生长因子BB(PDGF-BB，1-100ng/mL)、白介素-6(IL-6，1-100ng/mL)。

4.根据权利要求1所述的一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：所述(3)胰岛素添加量为5-500μg/mL，可为临床级用药或重组蛋白。

5.根据权利要求1所述的一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：所述(4)微量元素至少包括硒(10-100nM)，以亚硒酸钠或其它化合物形式提供，所述微量元素组合还可包括氯化铁(50-1000ng/mL)、氯化锰(1-100ng/mL)、氯化铜(50-1000ng/mL)、氯化铬和钼酸钠(100-1000ng/mL)。

6.根据权利要求1所述的一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：所述(5)脂类物质可为胆固醇(10-100μg/mL)，还可为亚油酸(1-50mg/L)、亚麻酸(1-50μg/mL)、中链甘油三酯(1-500μg/mL)、卵磷脂(0.1－20μg/mL)和注射用大豆油(1-500μg/mL)。

7.根据权利要求1所述的一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：所述(6)维生素类物质包括脂溶性和水溶性维生素两种，包括维生素B组如Vit-B5(1-100μM)、维生素A(1-200μM)、维生素C(50μg/mL)、维生素E(10-100μg/mL)。

8.根据权利要求1所述的一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：所述(7)激素类物质可为地塞米松(低于10^-9M)或氢化考的松(低于5μg/mL)。

9.根据权利要求1所述的一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：所述(8)蛋白质分子主要为注射用人白蛋白，添加量为5-50mg/mL；也可包括其它分子，如乙酰辅酶(0.1-10U/mL)、辅酶I(10-1000ng/mL)。

10.根据权利要求1所述的一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：所述(9)氨基酸类物质指多种氨基酸复合物，包括L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-丙氨酸、L-异亮氨酸、L-门冬氨酸、L-酪氨酸、L-谷氨酸、L-苯丙氨酸、精氨酸、赖氨酸、缬氨酸、苏氨酸、组氨酸、甲硫氨酸、胱氨酸和甘氨酸等，添加量为1-100μM。

11.根据权利要求1所述的一种培养间充质干细胞的培养基，其特征在于：所述(10)其它化合物包含有二巯基乙醇(1×10^-6M－1×10^-4M)和其它化合物，包括还原型谷胱甘肽(0.1-10mg/L)、胶原或纤连蛋白或明胶(10μg-10mg/mL)、wnt-3a(1-100ng/mL)和Bio(5-250nM)。

12.权利要求1－11任一项所述的一种培养间充质干细胞的培养基在培养间充质干细胞中的应用。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于：所述间充质干细胞包括人骨髓和人脐带来源的，也包括其它组织或其它动物的间充质干细胞。