[发明专利]一种萝芙木药材中利血平含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种萝芙木药材中利血平含量的测定方法。

背景技术

萝芙木是一种药用植物，是夹竹桃科植物萝芙木Rauvolfia verticillata（Lour.）Baill.的根，全世界有135个种，中国有9个种，世界上的主要分布在非洲、美洲、亚洲、大洋洲岛屿，中国主要分布在云南，其中印度、泰国、马来西亚、广西、广东、海南、贵州、台湾有少量分布。自从1952年Muller从萝芙木中提取利血平，发现其有降压和安定的作用，萝芙木被引起了广泛的重视。

萝芙木中主要成分是利血平，又名18-（3，4，5-三甲氧基苯甲酰）利血平酸甲酯，分子式为C₃₃H₁₀N₂O₉，在酸性溶液中稳定，在碱性溶液中加热容易水解，有降压和中枢作用。降压作用：利血平能降低血压和减慢心率，其作用非常缓慢、温和而持久；中枢作用：利血平对中枢神经系统具有持久性的安定作用，可能与它在脑组织内释放5-羟色胺或去甲肾上腺素有关。

除利血平外，萝芙木中还含有育亨宾、阿吗碱、蛇根亭碱、阿吗灵、山马蹄碱、萝芙木甲素等多种萜类吲哚生物碱，熊果酸。育亨宾有治疗动脉硬化、风湿病的作用。

《中国药典》2010年版中对利血平含量测定，在供试品溶液的制备中，取利血平原料约50mg，置100ml量瓶中，加冰醋酸3ml使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密取适量，用甲醇定量稀释制成每1ml约含40ug的溶液；另取利血平对照品，同法操作。色谱分析条件：色谱柱为十八烷基键合硅胶为填充剂，流动相为乙腈-1％乙酸铵（46：54）；检测波长为268nm。本法是利血平原料的方法。

《中华人民共和国国家知识产权局》专利申请号为200610048619.5，公开号为CN 101071129A，专利名称为“测定萝芙木属植物中利血平含量的高效液相色谱方法”。其特征在于：（1）取萝芙木药粉2g，加甲醇50ml，水浴回流提取1小时；（2）色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂；（3）流动相为乙腈、甲醇、0.01%三乙胺水溶液组成的混合溶剂，其组成的体积比例为乙腈45%～35%、甲醇10%～25%、三乙胺水溶液45%～40%；（4）检测波长268nm，柱温40 ℃，流速1.0 ml/min，进样体积20ul。本发明中没有考虑到利血平在甲醇中的溶解度有限，故萝芙木药材中利血平采用甲醇来提取会有提取不完全的可能性；本发明是在水浴回流温度条件下提取，温度高于60℃，而利血平60℃会水解，这样会影响测定结果的准确度。

《云南中医学院学报》2007年第30卷第2期的论文“高效液相色谱法测定萝芙木中利血平的含量”，报道了：（1）取萝芙木药粉2g，加甲醇50ml，浸泡2h，水浴回流1h；（2）色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂；（3）流动相为四氢呋喃-甲醇-0.3%磷酸（30：15：55）；（4）检测波长268nm，柱温35℃，流速1.0 ml/min。本发明中没有考虑到利血平在甲醇中的溶解度有限，故萝芙木药材中利血平采用甲醇来提取会有提取不完全的可能性；本发明是在水浴回流条件下提取，温度高于60℃，而60℃以上会水解；本发明中使用高达30%的四氢呋喃，容易腐蚀仪器管道和垫圈，这样会影响测定结果的准确度。

由于现有文献对萝芙木药材中利血平的测定缺乏系统的研究，而且分析样品制备的提取方法也存在甲醇对利血平的溶解度有限、水浴提取温度高、流动相成分复杂的缺点，所以有必要寻求更有效测定萝芙木药材中利血平的测定方法。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术存在的不足，提供一种提取完全，比较准确地测定萝芙木药材中利血平含量的方法。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种萝芙木药材中利血平含量的测定方法，包括以下步骤：

a、取利血平对照品，加醇溶液制成定量用对照品溶液；

b、萝芙木药材加醇溶液，称定重量，加热回流，补重，即得供

试品溶液；

c、依据高效液相色谱法测定，十八烷基键合硅胶填料的柱子，

乙腈：0.02%二乙胺溶液=80：20为流动相，检测波长为268nm，流

速1ml/min。取对照品溶液和供试品溶液分别进样，得到色谱图；

d、记录对照品溶液和供试品溶液对应的色谱峰的峰面积，以外

标法计算利血平的含量，即得。