[发明专利]常温等温快速检测埃博拉病毒的方法、试剂及引物和探针

权利要求书

1.常温等温快速检测埃博拉病毒的引物和探针，其特征在于，所述引物和探针的序列为：

NP-3-F：CATATGATGAAGGATGAGCCTGTAGTTTTCAG；

NP-3-R：CAGGATTGCCATGAATTTATTCCTGTGATTC；

NP-Probe：TCCACCATGGCTCACTGAAAAAGAGGCCA(F)G(H)A(B)GATGAGAATAGATTTG—SpacerC3；

其中，F为荧光基团，H为四氢呋喃位点，B为粹灭基团，3’末端为Spacer C3修饰。

2.常温等温快速检测埃博拉病毒的试剂，其特征在于，所述试剂包括聚乙二醇、Tris、乙酸钾、三磷酸腺苷、磷酸肌酸二钠盐、脱氧核糖核苷三磷酸、蔗糖、甘油、重组酶、单链DNA结合蛋白、DNA聚合酶、辅助蛋白、反转录酶、核酸外切酶和权利要求1所述的引物和探针。

3.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述试剂为冻干粉，由以下方法制成：将试剂在-80℃条件下预冻3-4小时，预冻结束后放入真空冷冻干燥机中进行干燥，先于-20～-45℃干燥2-10小时，最后10-18℃干燥1-2小时。

4.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于，在反应体系中，重组酶的浓度范围是220-280ng/μl；单链DNA结合蛋白的浓度范围是200-250ng/μl；DNA聚合酶的浓度范围是100-150ng/μl；辅助蛋白的浓度范围是70-100ng/μl；核酸外切酶的浓度范围是80-120ng/μl；反转录酶的浓度范围是150-200ng/μl。

5.权利要求1所述的引物和探针在制备检测埃博拉病毒的试剂中的应用。