[发明专利]血清糖化白蛋白含量测定方法及测定试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及医疗检测领域，特别涉及一种血清糖化白蛋白含量测定方法及测定试剂盒。

背景技术

血清糖化白蛋白在临床上主要用于反映近期(过去2周至1个月)的血糖控制情况。目前血清糖化白蛋白的测定主要采用酶法测定原理，分三步过程：1、先测定血清中的白蛋白含量；2、再测定血清中的糖化白蛋白含量；3、最后通过计算，用步骤2的结果除以步骤1的结果求得糖化白蛋白的百分比例。该检测方法步骤复杂，需要专用的测量仪器，检测时间长，同时由于检测的步骤多而导致检测结果准确性低。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种血清糖化白蛋白含量测定方法及测定试剂盒。本发明要解决的技术问题是：利用现有自动生化分析仪，简化检测步骤，一步法直接准确地测得血清糖化白蛋白的百分比例。

为实现上述技术目的，本发明中采取的技术方案为：血清糖化白蛋白含量的测定方法，包括以下步骤：

A.将待测血清样本加入亲水性纳米聚苯乙烯颗粒缓冲液中，血清样本中的白蛋白和糖化白蛋白被无差别吸附在亲水性纳米聚苯乙烯颗粒表面；

B.在步骤A所得的混合液中加入鼠抗人糖化白蛋白单克隆抗体，形成纳米颗粒-糖化白蛋白-鼠抗人糖化白蛋白单克隆抗体复合体；

C.向步骤B所得的混合体系中加入羊抗鼠糖化白蛋白抗抗体，步骤B所得复合体中的鼠抗人糖化白蛋白单克隆抗体与羊抗鼠糖化白蛋白抗抗体产生凝聚反应，凝聚量与吸附在亲水性纳米聚苯乙烯颗粒表面的糖化白蛋白的量成正比；

D.测定步骤C所得混合体系的吸光度的变化量，与吸光度变化校准曲线相对照，即可测得样本中糖化白蛋白的含量占比。

上述方案中，所述亲水性纳米聚苯乙烯颗粒缓冲液的摩尔浓度为50mM。

上述方案中，所述步骤D中，在570-650nm波长下检测吸光度的变化。

本发明还公开了一种血清糖化白蛋白含量测定试剂盒，包括试剂R1、试剂R2和校准品，所述试剂R1包括亲水性纳米聚苯乙烯颗粒缓冲液和鼠抗人糖化白蛋白单克隆抗体，所述试剂R2包括羊抗鼠糖化白蛋白抗抗体，所述校准品为糖化白蛋白校准液。

上述方案中，所述亲水性纳米聚苯乙烯颗粒的粒径为50-200纳米。

上述方案中，所述亲水性纳米聚苯乙烯颗粒缓冲液的摩尔浓度为50mM。

上述方案中，所述鼠抗人糖化白蛋白单克隆抗体的重量占比为1～1.5％。

上述方案中，所述羊抗鼠糖化白蛋白抗抗体的重量占比为2.0～2.6％。

上述方案中，所述试剂盒还包括质控品，所述质控品为糖化白蛋白质控液。

本发明的优点和有益效果在于：本发明提供一种血清糖化白蛋白含量测定方法及测定试剂盒，能够利用现有自动生化分析仪，简化检测步骤，一步法直接准确地测得血清糖化白蛋白的百分比例。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明在OLYMPUS AU400/640/2700/5400全自动生化分析仪的参数设定表

具体实施方式

下面结合附图和实施例，对本发明的具体实施方式作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。

本发明是一种血清糖化白蛋白含量的测定方法，包括以下步骤：

A.将待测血清样本加入亲水性纳米聚苯乙烯颗粒缓冲液中，血清样本中的白蛋白和糖化白蛋白被无差别吸附在亲水性纳米聚苯乙烯颗粒表面；

B.在步骤A所得的混合液中加入鼠抗人糖化白蛋白单克隆抗体，形成纳米颗粒-糖化白蛋白-鼠抗人糖化白蛋白单克隆抗体复合体；

C.向步骤B所得的混合体系中加入羊抗鼠糖化白蛋白抗抗体，步骤B所得复合体中的鼠抗人糖化白蛋白单克隆抗体与羊抗鼠糖化白蛋白抗抗体产生凝聚反应，凝聚量与吸附在亲水性纳米聚苯乙烯颗粒表面的糖化白蛋白的量成正比；

D.测定步骤C所得混合体系的吸光度的变化量，与吸光度变化校准曲线相对照，即可测得样本中糖化白蛋白的含量占比。