[发明专利]一种欧当归的检测试剂盒与检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种欧当归的检测试剂盒和检测方法。

背景技术

欧当归(Levisticum officinale Koch)，又名保当归，系伞形科欧当归属多年生草本植物。1957年，当归紧缺时从保加利亚引种，在我国河北、北京、山东、河南、内蒙古、辽宁、陕西、山西及江苏等地均有栽培。欧当归以干燥的根入药，早为德国药典所收载，香气特异而浑浊，性甘、味微辣、微甘而有麻舌感，具有利尿、健胃、祛痰、治疗妇科病等功效，是正品当归常见的伪品。

由于欧当归的药效不及当归，而且药理上也有较大的不同，因而不能作为当归使用，但是其本身有药效，而且栽培容易，生长期短。因此，有效鉴别欧当归，对其进合理使用是非常必要的。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种新的、方便、快速、准确地检测欧当归的试剂盒和方法。

本发明提供了SEQ ID NO.1所示的种核苷酸序列。

本发明还提供了检测SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的试剂在制备欧当归检测试剂中的用途。

所述检测SEQ ID NO.1所述核苷酸序列的试剂包括扩增SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的试剂。

所述欧当归是伞形科植物欧当归Levisticum officinalis Koch所述扩增的试剂包括SEQ ID NO.2～3所示的引物对。

本发明检测欧当归的试剂盒，包括检测SEQ ID NO.1所述核苷酸序列的相关试剂。

所述试剂包括扩增SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的试剂。

所述扩增的试剂包括SEQ ID NO.2～3所示的引物对。

本发明一种欧当归的检测方法，包括如下步骤：

a，DNA提取：提取待检样本中的DNA；

b，检测：用前述的试剂盒检测待检样本，即可。

本发明SEQ ID NO.1所示核苷酸序列为欧当归特异性序列，通过检测这些序列可以准确区分欧当归与当归、日本当归，从而有效鉴定待检样本是否 为欧当归，为药材的合理使用提供指导，本发明方法操作简便，具有良好的应用前景。

下面通过具体实施方式对本发明做进一步详细说明，但是并不是对本发明的限制，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更，都是本发明保护的内容。

附图说明

图1.欧当归的改良RAPD扩增。箭头为A13的RPAD片段，用于胶回收和克隆。

图2阳性克隆的菌落PCR鉴定。蓝色所指通道的阳性克隆用于Sanger测序。通道“M”显示有分子重量(bp)的DL2000DNA标记。泳道1-5分别代表不同阳性克隆的菌落。

图3不同物种及当归品种的鉴定。通道1-18号分别为甘肃岷县当归，日本当归，四川阿坝当归，甘肃平凉当归，湖北当归，四川九寨当归，欧当归，云南丽江当归，四川绵阳当归，银杏，荔枝，龙眼，青果，金银花，栀子花，灵芝，龙荔，赶黄草。蓝色所指的通道2为日本当归，通道7为欧当归。通道“M”显示有分子重量(bp)的DL2000DNA标记。

图4不同欧当归品种的鉴定。通道1、2和3是日本当归，分别来自重庆，四川峨眉，延吉吉林；通道4和5是欧当归，来自长春吉林和四川甘孜；6是正常岷县当归；通道“M”显示有分子重量(bp)的DL2000DNA标记。

具体实施方式

实施例1 RAPD技术扩增欧当归特异SCAR标记

一、CTAB法提取植物DNA