[发明专利]一种分离杨梅树皮中杨梅苷和儿茶素类化合物的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物有效成分提取的技术领域，公开了一种简单的分离、纯化杨梅树皮中杨梅苷和儿茶素类化合物的方法。

背景技术

经济水平的发展和提高导致社会中肥胖人群的数量不断增加。研究表明，从1993年到2006年，我国男性肥胖患者占总人口数的比例从17.9％上升到42.5％，而女性患者的比例从28.8％上升到46.9％。一项2010年发表的研究报告称，中国目前肥胖人口达3.25亿人，增幅超过美国、英国和澳大利亚。这个数字在未来20年还可能增加一倍。肥胖患者体内含有较高含量的总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)，而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则低于正常值。这些血脂代谢异常,会极大增加糖尿病、高血压、冠心病、粥状动脉硬化等心脑血管疾病的发病率。因此，急需研发具有预防肥胖，防止体内血脂异常，抗氧化、抗衰老等生物活性的保健药物。此外，此类药物还应具有无副作用，能够长期服用，价格便宜的特点。

研究证明杨梅苷不仅具有抗炎、镇痛、抗肿瘤、降血糖、抗氧化、抗衰老和保肝等多种功效，同时还具有美容功能，对高血压、糖尿病、高血脂等患者均有一定疗效。目前，美国美国食品与药品监督管理局已将杨梅苷广泛应用于医药、食品、保健品和化妆品。但国内外主要采用柱层析方法，包括硅胶柱、聚酰胺柱和葡聚糖凝胶柱来分离纯化杨梅苷。这些方法虽然能分离得到杨梅苷，但存在死吸附、耗时、耗有机溶剂、成本较高等缺陷。本发明介绍了一种无需柱层析来分离杨梅树皮中杨梅苷以及同时用硅胶柱来分离杨梅树皮中儿茶素类化合物的技术路线，具有较大的潜在利用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简便的从杨梅树皮中提取杨梅苷和儿茶素类化合物的方法，该方法具有简单、高效、低成本、污染少等优点。所制备的杨梅苷和儿茶素类化合物纯度能达到95％以上，可开发成具有抗心血管疾病、抗癌、抗衰老、抗氧化和美容等功效的药品、食品、保健品和化妆品。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种简易分离杨梅树皮中杨梅苷和儿茶素类化合物的方法，包括以下步骤：

1)杨梅树皮风干后粉碎备用；

2)乙醇浸提，提取液浓缩得浸膏；

3)将步骤2)得到的杨梅树皮提取浸膏用水搅拌溶解，加入石油醚萃取至上清液无色，然后将石油醚萃取后分离的下层杨梅树皮提取物用乙酸乙酯萃取至上清液无色，再将乙酸乙酯萃取后分离得到的下层杨梅树皮提取物用正丁醇萃取，萃取剩余得到含棕色颗粒状水相；

4)步骤3)所得的萃取剩余棕色颗粒状水相加入乙酸乙酯，加热、搅拌，过滤得到上清液，重结晶获得杨梅苷；

5)儿茶素类化合物的制备

将步骤3)中乙酸乙酯萃取得到的上清液合并旋转蒸发浓缩所得浸膏用硅胶拌样后，干法上硅胶柱，用石油醚和乙酸乙酯混合物冲柱，收集冲下来的洗脱液，旋转蒸发浓缩后重结晶，制备得儿茶素类化合物。

本发明方法中所述的杨梅树皮优选采自7月份。

步骤2)的具体过程如下：

将粉碎后的杨梅树皮粉末加入75-95％酒精，原料和酒精的质量体积比为1g:3ml至1g:10ml，室温下浸提8-16h后过滤，依照此法浸提1-3次合并提取液，旋转蒸发仪浓缩，浓缩浸膏在45-65℃烘箱中烘干，使水含量小于10％。

步骤3)的具体过程如下：

将杨梅树皮提取浸膏用去离子水按照质量体积比为1g:3ml-1g:5ml搅拌溶解，溶解后按体积比1:1-1:3加入石油醚萃取，静止去乳化层，合并上清，用石油醚萃取至上清液无色后，将下层杨梅树皮提取物用乙酸乙酯按照体积比1:1-1:3萃取，离心去除乳化层，合并上清，待乙酸乙酯萃取至上清液无色后，将下层杨梅树皮提取物用正丁醇按照体积比1:1-1:3萃取，摇晃后离心去除乳化层，合并上清，待正丁醇萃取至上清液无色后，萃取剩余的含棕色颗粒状水相备用。用乙酸乙酯和正丁醇萃取时，2000-5000rpm离心3-5分钟来去除乳化层。

步骤4)的具体过程如下：

步骤3)所得的萃取剩余棕色颗粒状水相按体积比1:2-1:5加入乙酸乙酯，搅拌后置于60-80℃水浴加热并搅拌，过滤得上清液，保鲜膜封口，其上用针扎小孔便于杨梅苷晶体的析出。

步骤5)的具体过程如下：