[发明专利]一种PK细胞培养基

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种无血清培养基。

背景技术

PK(猪肾)细胞培养基是指不需要添加血清就可以维持细胞在体外长时间生长和繁殖的合成培养基，由多种氨基酸、维生素、微量元素以及无机化合物组成，为动物细胞提供最优化的生长环境。PK细胞培养基生产属于生物医药行业的基础产品。随着生物制药和生物医疗行业技术的更新换代，细胞培养技术也在不断进化，血清用量逐渐减少直至停止使用血清培养动物细胞。生产企业需要不断创新技术，开发高质量PK细胞培养基产品满足下游客户需求。如今市场上PK细胞培养基用料较复杂，成本较高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种PK细胞培养基，以解决上述技术问题。

本发明所解决的技术问题可以采用以下技术方案来实现：

一种PK细胞培养基，其特征在于，以终浓度计，配方包括：4-羟乙基哌嗪乙磺酸3000mg/L～4000mg/L、氯化钠6000mg/L～7000mg/L、D-(+)-葡萄糖3000mg/L～4000mg/L、碳酸氢钠1000mg/L～2000mg/L、还原型谷胱甘肽0.01mg/L～10mg/L、柠檬酸铁铵0.001mg/L～10mg/L和尿嘧啶0.01mg/L-10mg/L。

本发明在配方中加入了所述4-羟乙基哌嗪乙磺酸和所述碳酸氢钠充当缓冲剂能够维持培养基内PH值的恒定。所述4-羟乙基哌嗪乙磺酸为缓冲剂，所述D-(+)-葡萄糖在培养基中起到还原剂的作用。所述氯化钠的作用为维持培养基内的渗透压。本发明优化了传统一种PK细胞培养基的配方，节约了成产成本，更适宜动物细胞的生长，提高细胞培养的效率。本发明适用于VERO，PK15，MAC145细胞，适用性强。

所述配方包括所述4-羟乙基哌嗪乙磺酸3500mg/L～3600mg/L、所述氯化钠6900mg/L～7000mg/L、所述D-(+)-葡萄糖3100mg/L～3200mg/L、所述碳酸氢钠1000mg/L～1300mg/L、还原型谷胱甘肽0.01mg/L～1mg/L、柠檬酸铁铵0.01mg/L～1mg/L和尿嘧啶0.01mg/L-1mg/L；所述配方中还包括：叶酸2mg/L～3mg/L、烟酰胺2mg/L～3mg/L、甘氨酸10mg/L～20mg/L、氯化镁20mg/L～30mg/L、氯化钙100mg/L～200mg/L和核黄素0.2mg/L～0.5mg/L。

本发明通过在配方中加入叶酸和核黄素能促进细胞的分裂和再生。烟酰胺可促进生物氧化过程和组织新陈代谢。

所述配方中还包括硫酸铜五水合物0.001mg/L～0.002mg/L、生物素0.003mg/L～0.004mg/L、亚油酸0.04mg/L～0.05mg/L、硝酸铁九水合物0.1mg/L～0.2mg/L和硫辛酸0.1mg/L～0.2mg/L。所述生物素促进脂肪和蛋白质正常代谢。

所述配方中还包括氯化钾300mg/L～400mg/L、胸苷0.3mg/L～0.4mg/L、硫酸亚铁七水合物0.4mg/L～0.5mg/L、硫酸锌七水合物0.4mg/L～0.5mg/L、维生素B12为0.6mg/L～0.7mg/L和盐酸吡哆醇2mg/L～3mg/L。所述胸苷在培养基中充当药物中间体，所述维生素B12起到促进细胞再生的作用，所述盐酸吡哆醇刺激白细胞的生长，是形成血红蛋白所需要的物质。

所述配方中还包括盐酸硫胺2mg/L～3mg/L、泛酸钙2mg/L～3mg/L、L-丙氨酸4mg/L～5mg/L、L-天冬氨酸6mg/L～7mg/L、L-谷氨酸7mg/L～8mg/L和L-天冬酰胺一水合物7mg/L～8mg/L。泛酸钙和L-谷氨酸在培养基中参与蛋白质、脂肪和糖类的新城代谢，促进氧化过程；L-丙氨酸为培养基提供养分。

所述配方中还包括氯化胆碱8mg/L～9mg/L、L-色氨酸9mg/L～10mg/L、内消旋肌醇12mg/L～13mg/L、L-甲硫氨酸17mg/L～18mg/L、L-脯氨酸17mg/L～18mg/L和L-半胱氨酸盐酸盐一水合物17mg/L～18mg/L。L-脯氨酸促进蛋白质的合成。