[发明专利]一种解淀粉芽孢杆菌及其固态菌剂的制备方法与应用在审
申请号: | 201510342516.9 | 申请日: | 2015-06-18 |
公开(公告)号: | CN104962492A | 公开(公告)日: | 2015-10-07 |
发明(设计)人: | 李平兰;游成真;尚庆茂;秦宇轩;张志刚;于亚琼;王卉 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/02;A01P21/00;A01N25/12;C12R1/07 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 淀粉 芽孢 杆菌 及其 固态 制备 方法 应用 | ||
1.一种解淀粉芽孢杆菌,其特征在于,其保藏登记号为CGMCC NO.10045。
2.一种解淀粉芽孢杆菌固态菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌,进行活化、增殖后,获得有效活菌数为0.1~1.0×109cfu/ml的种子液;
(2)将所述种子液按15~35mL/100g与固体含水培养基混合均匀,将所得的混合物在30~40℃静置培养2~5d,干燥至混合物含水量为10%以下,粉碎过筛,即得。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述固体含水培养基包括以下重量份的成分:花生饼粉25~55份,麦麸20~55份,棉粕11.5~40份,碳酸钠0.1~1.0份,葡萄糖0.1~1.0份,蛋白胨0.1~1.0份;还包括占全部固体物料重量之和30~60%的水。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述固体含水培养基包括以下重量份的成分:花生饼粉25~53份,麦麸31.4~55份,棉粕11.5~17份,碳酸钠0.2~1.0份,葡萄糖0.2~1.0份,蛋白胨0.2~1.0份;还包括占全部固体物料重量之和30~45%的水。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于,所述方法还包括:将固体含水培养基混合均匀后,以200~350g/L装入培养瓶中。
6.根据权利要求3~5任意一项所述的制备方法,其特征在于,所述固体含水培养基在与种子液混合前,在120~125℃条件下间歇灭菌两次,每次灭菌30~45min。
7.根据权利要求2~6任意一项所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述静置培养具体为:在35℃条件下静置培养3~5d。
8.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌,在LB固体平板培养基上划线,在30~40℃活化24~36h;取活化后的健壮、典型菌落,接种于10ml LB液体培养基中,在30~40℃培养24~36h;再接种于300ml LB液体培养基中,在30~40℃培养24~36h,获得有效活菌数为0.1~1.0×109cfu/ml的种子液;
(2)将所述种子液按15~30ml/100g与固体含水培养基混合均匀;所述固体含水培养基由包括以下步骤的方法制备而成:取花生饼粉25~53份、麦麸31.4~55份、棉粕11.5~17份、碳酸钠0.2~1.0份、葡萄糖0.2~1.0份、蛋白胨0.2~1.0份以及占全部固体物料重量之和30~45%的蒸馏水,混合均匀后,以200~350g/L装入培养瓶中,在121℃条件下间歇灭菌两次,每次灭菌30~45min,即得;
将种子液与固体含水培养基的混合物在35℃条件下静置培养3~5d,干燥至混合物含水量为5~10%,粉碎过筛,即得。
9.权利要求2~8任意一项所述方法制备而成的解淀粉芽孢杆菌固态菌剂。
10.权利要求9所述解淀粉芽孢杆菌固态菌剂在促进植物生长中的应用,其特征在于,在每升植物培养基质中添加0.01~10g所述解淀粉芽孢杆菌固态菌剂。
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