[发明专利]一种ST细胞培养基

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及培养基。

背景技术

ST细胞系猪睾丸(swinetestis)细胞，体外培养呈贴壁生长，培养过程中增殖较为缓慢，且细胞消化传代中容易成团。ST细胞对多种病毒比较敏感，如猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒等。目前ST细胞通过动物血清培养，动物个体不同，血清产地、批号不同，每批质量差异甚大，其成分不能保持一致，容易产生细菌和病毒，不利于细胞的培养，虽然使用动物血清成本较低但是不容易培养出较纯的细胞不利于长期发展。

发明内容

本发明的目的在于提供一种ST细胞培养基，以解决上述技术问题。

本发明所解决的技术问题可以采用以下技术方案来实现：

一种ST细胞培养基，其特征在于，以终浓度计，配方如下：L-精氨酸盐酸盐1mg/L-1000mg/L、2-巯基乙醇0.1mg/L-200mg/L、内消旋肌醇0.01mg/L-10mg/L、一乙醇胺盐酸盐1mg/L-1000mg/L、植物水解物50mg/L-5000mg/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸1000mg/L-4000mg/L、氯化钠1000mg/L-7000mg/L和甘氨酸1mg/L-100mg/L。

本发明减少ST细胞培养过程中产生的病毒，增大存活率加快增殖速度。2-巯基乙醇在培养基中充当抗氧化剂，4-羟乙基哌嗪乙磺酸和甘氨酸作为一种缓冲剂调节培养基中的PH值，氯化钠能维持培养基内渗透压的稳定。

所述配方还包括：L-精氨酸盐酸盐1mg/L-100mg/L、2-巯基乙醇0.1mg/L-100mg/L、内消旋肌醇0.01mg/L-1mg/L、一乙醇胺盐酸盐100mg/L-1000mg/L、植物水解物2000mg/L-5000mg/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸3000mg/L-4000mg/L、氯化钠6000mg/L-7000mg/L、甘氨酸10mg/L-20mg/L硫酸镁1mg/L-1000mg/L、氯化钾50mg/L-5000mg/L、磷酸钠1mg/L-1000mg/L、L-半胱氨酸盐酸盐1mg/L-1000mg/L和胸苷0.3mg/L-0.4mg/L。

本发明通过优化了部分数据使培养基成分更加精确，硫酸镁能促进培养基中糖和蛋白质的代谢加快细胞增殖速度，氯化钾能调节培养基中的电解质平衡，L-半胱氨酸盐酸盐在培养基中起到还原剂的作用，胸苷在培养基中充当药物中间体。

所述配方还包括：L-谷氨酰胺50mg/L-5000mg/L、L-组氨酸盐酸盐1mg/L-1000mg/L、L-异亮氨酸1mg/L-1000mg/L、L-亮氨酸1mg/L-1000mg/L、L-赖氨酸盐酸盐1mg/L-1000mg/L、L-蛋氨酸1mg/L-1000mg/L和维生素B12的含量为0.6mg/L-0.7mg/L。维生素B12起到促进细胞再生的作用，L-谷氨酰胺能提高培养基的抗氧化能力，L-亮氨酸能促进培养基中糖类的代谢，L-赖氨酸盐酸盐促进培养基中蛋白质的代谢。

所述配方还包括：L-苯丙氨酸1mg/L-1000mg/L、L-苏氨酸1mg/L-1000mg/L、L-色氨酸1mg/L-1000mg/L、L-酪氨酸二钠盐1mg/L-1000mg/L、L-缬氨酸1mg/L-1000mg/L和D-泛酸钙0.01mg/L-10mg/L。L-苏氨酸能促进细胞生长、提高免疫机能减少被病毒感染的几率，L-色氨酸在培养基中起到抗氧化剂的作用，D-泛酸钙帮助细胞形成，控制脂肪代谢。

所述配方还包括：氯化胆碱0.01mg/L-10mg/L、叶酸0.01mg/L-10mg/L、烟酰胺0.01mg/L-10mg/L、盐酸吡哆醛0.01mg/L-10mg/L、核黄素0.01mg/L-10mg/L、盐酸硫胺0.01mg/L-10mg/L和D-(+)-葡萄糖50mg/L-5000mg/L。氯化胆碱能增加培养基内细胞的数量，叶酸和核黄素能促进细胞的分裂和再生，烟酰胺促进生物氧化过程和组织新陈代谢，盐酸硫胺参与糖类的中间代谢。