[发明专利]一种筛选和判定光周期敏感型卤虫种群的方法

说明书

技术领域

本发明涉及水产经济动物种质筛选研究领域，特别是涉及一种筛选和判定光周期敏感型卤虫种群的方法。

背景技术

卤虫是一类重要的水产经济甲壳动物，其休眠卵因易于贮藏和运输，且孵化的无节幼体和成体卤虫用于水产苗种的开口饵料操作简单方便，其优良的营养价值和较高的经济价值而被誉为“软黄金”。近年来随着水产养殖业的快速发展提升了对卤虫卵的需求，在天然捕捞卤虫卵市场价格居高不下的刺激下，许多内陆和沿海的养殖户尝试对卤虫开展人工增养殖以获取收益。但由于缺乏人工良种,且养殖过程中不能有效的控制卤虫的繁殖模式(卤虫具有两种繁殖模式,分别是卵生模式：母体产休眠卵；卵胎生模式：母体产无节幼体)，在水产动物苗种(如高档鱼、虾、蟹、海蜇等)培育期本希望获得更多的无节幼体或成体，养殖的卤虫却往往产休眠卵；而在非苗种培育季节，养殖户却往往收获的是大量无节幼体及其长成的卤虫成体，由于加工、运输和使用的不便，卤虫成体销售困难，因此经济价值大打折扣。近年来研究发现光照周期是影响卤虫繁殖方式比较重要的因素之一，因此筛选光周期敏感型的卤虫种群作为养殖种源将有利于通过控制光周期(延长或缩短)实现卤虫的繁殖模式光控化养殖，另外也可以在杂交育种中作为亲本之一用于培育同时具有光周期敏感性和其他经济性状的杂交良种。

在本世纪初全球共发现卤虫分布点600多个，而中国分布点也接近300个，从如此众多的卤虫种群中准确筛选出光周期敏感型卤虫任务艰巨,显然建立光周期敏感性卤虫的筛选方法，并以此判定出光周期敏感型卤虫用于卤虫的繁殖模式光控化养殖产业，和杂交育种将具有重要的经济意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种筛选和判定光周期敏感型卤虫种群的方法，为实现卤虫的繁殖模式光控化人工养殖以及卤虫杂交育种提供重要的技术支持，以弥补现有技术的不足。

本发明的光周期敏感型包括两种：光周期敏感性强和光周期敏感性极强的卤虫种群。

本发明的步骤如下：

第一步，首先取野生卤虫休眠卵孵化的卤虫无节幼体各100只，分别隔离养殖在超生态范围的长光照周期和短光照周期中进行培养，即为长光照周期L16-18:D8-6和为短光照周期L8-6：D16-18；且两种光照周期下，光照期间光强均为1000-2000Lux，黑暗期间光照强度低于10Lux，两种养殖水体的盐度和温度相同即盐度70-110ppt、温度20-25℃，按照常规的饲喂方法养殖，养殖至卤虫性成熟并开始繁殖，按照实验生态学操作规范,各组均设置3个生物学重复试验。

第二步，然后统计两种光照周期下各组中所有参与繁殖的成体卤虫第一胎的繁殖类型---卵胎生模式或者卵生模式，并分别计算两种光照周期养殖条件下卵胎生模式的雌性个体占所有参与繁殖的雌性个体的比例A，分别记作A₁,A₂；对A₁,A₂进行单因素方差分析，如果P_A>0.05,则光周期敏感性弱，判定为非光周期敏感型卤虫；如果P_A<0.05，则为光周期敏感性强的卤虫种群。

对上述筛选出光周期敏感性强的卤虫种群,为了满足筛选目的的差异化需求，进一步筛选的步骤如下：

首先取上述P_A<0.05光周期敏感性强的卤虫种群，并将养殖在L16-18:D8-6光照周期条件下获得的无节幼体(子代卤虫)，再分成2组，每组100只，同样设置三组生物学重复试验,并分别养殖在上述长、短两种光照周期的养殖条件下，至性成熟并开始繁殖；

然后记录上述子代卤虫成熟后第一胎的繁殖类型，分别统计两种光照周期下卵胎生模式繁殖的雌性个体占所有参与繁殖的雌性个体的比例B，记作B₁,B₂；对B₁,B₂进行单因素方差分析，如果P_B<0.01，则子代卤虫光周期敏感性极强；如果P_B<0.05，则子代卤虫光周期敏感性强；如果P_B>0.05,在子代卤虫光周期敏感性弱，仍判定为非光周期敏感型卤虫。

上述的P_A<0.05且P_B<0.01的卤虫种群是光周期敏感性极强的种群，作为亲本之一应用于卤虫杂交育种和作为养殖种源应用于卤虫繁殖模式的光控化人工养殖。