[发明专利]一种类肝素的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别是涉及一种生化药物类肝素的制备方法。

背景技术

类肝素即类似肝素的物质，是在化学结构上与肝素有一定程度的类似、具有抗凝血活性的酸性黏多糖类物质。具有抗血栓形成、消炎、止痛、改善患处血液循环、吸收渗出物、治愈水肿及浮肿、促进组织修复等作用。临床适用于血管栓塞、静脉曲张、浅表静脉炎、淋巴腺炎、乳腺炎与软化瘢痕。

目前关于类肝素的发明专利文献已有报道，例如日本专利文献(JP，S47-30167)采用浓硫酸作磺化剂，低温下与硫酸软骨素在吡啶中反应制备类肝素，日本专利文献(JP，S59-133201)则采用以浓硫酸和氯磺酸的混酸作磺化剂，对硫酸软骨素进行结构修饰的制备方法。这些方法均使用了很大过量的浓硫酸，耗酸量大，对生产设备腐蚀严重，废液处理困难，不利于环境保护，而且生产工艺关键点难以控制，所得产物的分子量范围不稳定，因而产品的活性等性能指标也难以控制。

欧洲专利文献(EP1634893)报道了以氯磺酸为磺化剂，在甲酰胺溶剂中反应制备类肝素的方法，虽然该方法制备的类肝素大部分理化指标易于控制，但“总氮”指标难于控制在标准范围内，而且氯磺酸为危险品，遇水即爆炸，不利于运输和储存，反应过程中放热并产生大量烟雾，生产操作中存在很大的安全隐患。另外，申请人重复上述文献的方法时，产物的收率较低，生产成本较高，因而不适合大规模工业化生产。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于改进现有技术存在的缺陷而提供一种类肝素的制备方法，该方法环保，且产品收率高。

为了实现本发明的目的，提供的主要技术方案如下，具体步骤包括：

一种类肝素的制备方法，包括：以硫酸软骨素为原料，经磺化反应后处理得到类肝素；所述磺化反应采用的溶剂为甲酰胺，采用的磺化剂为游离三氧化硫(气态或液态)、发烟硫酸或吡啶三氧化硫。

所述后处理过程一般包括沉淀除杂、离子交换树脂脱盐、减压浓缩除胺、过氧化氢脱色和冷冻干燥过程得到类肝素。

进一步讲，上述制备方法包括以下步骤：

(1)磺化反应：将硫酸软骨素溶解于5～10倍体积的甲酰胺中，加入磺化剂，于0～80℃温度下搅拌反应3～12小时，然后加入有机溶剂终止反应，静置沉降，收集沉淀物；

(2)沉淀除杂：将步骤(1)获得的沉淀物配成10～20％W/V浓度的水溶液，调节水溶液的pH值至6～8，加入2～3倍体积量的有机溶剂使之沉淀；再将沉淀物配成20～40％W/V浓度的水溶液，加入2～3倍体积量的有机溶剂使之沉淀，收集沉淀物；

(3)离子交换树脂脱盐：将步骤(2)最终获得的沉淀物配成10～30％W/V浓度的水溶液，依次经强酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂，进行离子交换除盐，收集pH值小于4的部分，然后将收集液的pH值调至6.5～7.5；

(4)减压浓缩除胺：将步骤(3)获得的收集液加热至35～45℃，减压浓缩蒸去有机溶剂，然后调节pH值至10.5～12，加热至45～55℃，减压浓缩除去部分水并带出残留有机溶剂，得到浓缩液；

(5)过氧化氢脱色和冷冻干燥：将步骤(4)获得的浓缩液的pH值调节至10～12，经过氧化氢脱色后，调节体系的pH值至6～7，冷冻干燥得类肝素。

在上述的类肝素的制备方法中，所用原料硫酸软骨素来自猪、牛的软骨组织中，产品以钠盐的形式存在。采购厂家包括嘉兴恒杰生物制药有限公司、浙江澳兴生物科技有限公司、四川贝奥生物制药有限公司、山东益宝生物制品有限公司、济南盛林生物工程有限公司等公司。

上述步骤(1)中，反应温度优选为0～60℃，反应时间优选为3～6小时。作为优选，步骤(1)中，当所述磺化剂为吡啶三氧化硫时，磺化反应温度为45～55℃，反应时间为3.5～4.5小时。当所述磺化剂为发烟硫酸时，磺化反应温度为20～30℃，反应时间为5～6小时。当所述磺化剂为游离三氧化硫(气态或液态)时，磺化反应温度为0～10℃，反应时间为2.5～3.5小时。采用上述技术方案时，避免使用大量硫酸，环保压力小的同时，提高了产品的最终收率，相对于现有技术，能够提高10％以上的收率。作为进一步优选，所述磺化剂为吡啶三氧化硫，采用该技术方案时，收率更好，高达95％以上，且操作简单，后处理方便。作为优选，步骤(1)中，终止反应的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮中的至少一种。

本发明中，采用步骤(2)的沉淀除杂，主要用于去除水溶液中多余硫酸，同时进一步去除残留的甲酰胺。步骤(2)中所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮中的至少一种。